パーキンソン病における黒質神経細胞死の機序と保護因子の探索

帕金森病黑质神经元死亡机制及保护因素探讨

基本信息

批准号：
08256214
负责人：
赤池昭紀
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

一酸化窒素(NO)神経毒性に対して抵抗性を示す中脳黒質ドパミン(DA)ニューロンの細胞内機序について、ラット胎仔由来培養黒質細胞を用いて、検討を行った。培養中脳細胞にグルタミン酸を短時間投与することにより、DAニューロンおよび非DAニューロンともに、遅延性の生存率低下が観察された。しかし、非DAニューロンに対するグルタミン酸毒性がNO合成酵素(NOS)阻害薬により抑制されたのに対して、DAニューロンに対するグルタミン酸毒性はNOS阻害薬の影響を受けなかった。NOドナーのS‐nitrosocysteine(SNOC)を短時間投与し、その後、SNOC不含液で3日間インキュベートすることにより、非DAニューロンの生存率は著名に減少したが、DAニューロンの生存率には変化は認められなかった。また、SNOC誘発毒性は抗酸化剤であるアスコルビン酸の投与による影響を受けなかった。一方、NOの代謝産物であるperoxynitriteanionを産生するSIN‐Iは、DAニューロンおよび非DAニューロンともに、神経毒性を示した。さらに、単独では神経毒性を誘発しない低濃度(1〜10mM)のMPP^+を2日間前投与したところ、DAニューロンにおいてNOドナーが濃度依存的な神経毒性を誘発するようになった。しかし、非DAニューロンにおけるNOドナーの毒性は^+の影響を受けなかった。以上の結果から、NO神経毒性に対するDAニューロンの抵抗性は、NOとの反応によりperoxynitriteanionを生じるsuperoxide anionの産生抑制に基づくこと、また、その抵抗性は^+により選択的に減弱されることが示唆された。

使用源自大鼠胎儿的培养的黑质细胞，研究了对一氧化氮（NO）神经毒性表现出对一氧化氮（NO）神经毒性表现出耐药性的室内遗迹的细胞内机制。短期谷氨酸对培养的中脑细胞的施用导致DA和非DA神经元的存活率降低延迟。然而，无合酶（NOS）抑制剂抑制了对非DA神经元的谷氨酸毒性，而谷氨酸对DA神经元的毒性不受NOS抑制剂的影响。缓慢地施用没有供体S-亚硝基糖粉（SNOC），然后在无SNOC溶液中孵育3天，显着降低了非DA神经元的存活率，但在DA神经元的存活率中未观察到任何变化。此外，SNOC诱导的毒性不受抗氧化剂抗坏血酸的施用的影响。另一方面，产生过氧亚硝化的SIN-I（一种NO代谢产物）在DA和非DA神经元中均表现出神经毒性。此外，当单独以低浓度（1-10 mm）为单位施用MPP^+，这不诱导神经毒性2天，没有捐助者开始在DA神经元中诱导浓度依赖性神经毒性。但是，非DA神经元中没有供体的毒性不受 ^+的影响。这些结果表明，DA神经元对NO神经毒性的耐药性是基于抑制超氧化阴离子的产生，该阴离子的产生对NO产生过氧氮，并且其耐药性被 ^+选择性地衰减。