線条体由来非蛋白性物質によるドーパミンニューロン死の制御

纹状体来源的非蛋白质物质控制多巴胺神经元死亡

基本信息

批准号：
09280214
负责人：
赤池昭紀
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

グルタミン酸-一酸化窒素(NO)系により誘発されるドパミン(DA)ニューロン死を抑制する内在性物質を探索する目的で以下3項目の研究を実施した。1)培養中脳切片のグルタミン酸神経毒性に対する線条体切片共培養の効果:培養線条体細胞に由来する神経保護活性を検討する目的で、ラット新生仔より黒質を含む中脳切片および線状体切片を摘出し共培養を行った。共培養により中脳切片から線条体切片へのDAニューロン投射が確認された。中脳切片にNMDAを投与することにより濃度依存的にDAニューロン数が減少した。NMDA神経毒性は中脳切片単独の培養で顕著に現れ、中脳と線状体の共培養により著明に減弱した。このような共培養による保護作用は中脳と小脳の共培養では観察されなかった。2)培養線条体細胞条件培地(CM)および牛胎児血清(FCS)のグルタミン酸神経毒性に対する保護作用:ラット胎仔より摘出・単離した培養線条体細胞はグルタミン酸神経毒性に対して抵抗性を示した。培養大脳皮質細胞のグルタミン酸神経毒性に対するCMの作用を検討したところ、CMおよびその凍結乾燥物がグルタミン酸神経毒性を抑制し、その神経保護活性成分はエーテル等の有機溶媒により抽出された。CM中に10%含まれるFCSのエーテル抽出物にも弱いグルタミン酸神経毒性作用が認められた。FCSエーテル抽出物はNOドナーの神経毒性も抑制した。これらの結果は、CM中およびFCSに含まれる非蛋白性の疎水性化合物がNOを介するグルタミン酸神経毒性を抑制することを示す。3)D2受容体アゴニストの神経保護作用:培養中脳細胞をD2受容体アゴニストのブロモクリプチンで前処理することにより、グルタミン酸および活性酸素種の細胞毒性がDAおよび非DAニューロンの両者で共に抑制された。以上の結果はD2受容体の持続的刺激により細胞の活性酸素種除去能が高まることによりグルタミン酸神経毒性が抑制されることを示す。

我们进行了以下三项研究，以寻找抑制谷氨酸-一氧化氮（NO）系统诱导的多巴胺（DA）神经元死亡的内源性物质。 1)纹状体切片共培养对培养中脑切片中谷氨酸神经毒性的影响：为了检查培养的纹状体细胞的神经保护活性，收集了新生大鼠的中脑切片和含有黑质的纹状体切片。并共培养。通过共培养，证实了从中脑切片到纹状体切片的 DA 神经元投射。向中脑切片施用 NMDA 会以浓度依赖性方式减少 DA 神经元的数量。当中脑切片单独培养时，NMDA 神经毒性很明显，而中脑和纹状体共培养则显着减弱。在中脑和小脑共培养中没有观察到共培养的这种保护作用。 2）培养的纹状体细胞条件培养基（CM）和胎牛血清（FCS）对谷氨酸神经毒性的保护作用：从大鼠胎儿中分离的培养的纹状体细胞显示出对谷氨酸神经毒性的抵抗力。我们在研究CM对培养的大脑皮质细胞谷氨酸神经毒性的影响时发现，CM及其冻干品具有抑制谷氨酸神经毒性的作用，并且用乙醚等有机溶剂提取其神经保护活性成分。 CM中含有10%的FCS乙醚提取物中也观察到了微弱的谷氨酸神经毒性作用。 FCS乙醚提取物还抑制NO供体的神经毒性。这些结果表明CM和FCS中含有的非蛋白质疏水化合物抑制NO介导的谷氨酸神经毒性。 3）D2受体激动剂的神经保护作用：用D2受体激动剂溴隐亭预处理培养的中脑细胞，抑制了DA和非DA神经元中谷氨酸和活性氧的细胞毒性。这些结果表明，持续刺激 D2 受体可以通过增加细胞去除活性氧的能力来抑制谷氨酸神经毒性。