パーキンソン病における黒質神経細胞死の機序と保護因子の探索

帕金森病黑质神经元死亡机制及保护因素探讨

基本信息

批准号：
07264221
负责人：
赤池昭紀
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07264221/
关键词：
グルタミン酸黒質細胞死チロシン水酸化酵素ドパミン MPP^+MPTP NO

项目摘要

中脳黒質ドパミン(DA)ニューロン死における一酸化窒素(NO)の関与を明らかにする目的で、ラット胎仔由来培養黒質細胞を用いて、NO誘発神経毒性に対するMPP^+の作用を検討した。培養中脳細胞にグルタミン酸を短時間投与することにより、DAニューロンおよび非DAニューロンともに、遅延性の生存率低下が観察された。DAおよび非DAニューロンに対するグルタミン酸毒性はNMDA受容体拮抗薬のMK-801により抑制された。MPP^+を2日間投与することにより30μM以上の濃度で著明な神経毒性が誘発された。MPP^+毒性はDAおよび非DAニューロンの両者で観察されたが、DAニューロンの方が非DAニューロンよりMPP^+毒性を強く受けた。NOドナーのS-nitrosocysteine(SNOC)を短時間投与し、その後、SNOC不含液で3日間インキュベートすることにより、非DAニューロンの生存率は著明に減少したが、DAニューロンの生存率には変化は認められなかった。SNOC誘発毒性はヘモグロビンおよびスーパーオキシドジスムターゼにより抑制された。グルタミン酸の短時間投与はDAおよび非DAニューロンの両者に対して神経毒性が誘発したが、非DAニューロンに対するグルタミン酸毒性がNO合成酵素阻害薬により抑制されたのに対して、DAニューロンに対するグルタミン酸毒性はNO合成酵素阻害薬の影響を受けなかった。そこで、単独では神経毒性を誘発しない低濃度(1〜10μM)のMPP^+を2日間前投与したところ、DAニューロンにおいてNOドナーが濃度依存的な神経毒性を誘発するようになった。一方、非DAニューロンにおけるNOドナーの毒性はMPP^+の影響を受けなかった。以上の結果は、培養中脳細胞において、MPP^+はDAニューロンのNO毒性に対する抵抗性を選択的に減弱する作用を持つことを示す。したがって、MPP^+のグルタミン酸増強作用においてNOがキ-・ファクターとして働くことが示唆される。

为了阐明一氧化氮（NO）参与中脑中脑多巴胺（DA）神经元死亡，我们研究了MPP^+使用源自大鼠胎儿的培养的Nigra细胞对NO诱导的神经毒性的影响。短期谷氨酸对培养的中脑细胞的施用导致DA和非DA神经元的存活率降低延迟。 NMDA受体拮抗剂MK-801抑制了对DA和非DA神经元的谷氨酸毒性。 MPP^+施用2天会在浓度高于30μm时诱导明显的神经毒性。在DA和非DA神经元中都观察到MPP^+毒性，但是DA神经元比非DA神经元更强烈。缓慢地施用没有供体S-亚硝基糖粉（SNOC），然后在无SNOC溶液中孵育3天，显着降低了非DA神经元的存活率，但在DA神经元的存活率中未观察到任何变化。 SNOC诱导的毒性被血红蛋白和超氧化物歧化酶抑制。短期谷氨酸给药诱导了DA和非DA神经元的神经毒性，而无合酶抑制剂抑制了谷氨酸对非DA神经元的毒性，而谷氨酸对DA神经元的毒性不受合成酶抑制剂的影响。因此，当单独以低浓度（1-10μM）施用MPP^+（未诱导神经毒性2天）时，没有供体开始在DA神经元中诱导浓度依赖性神经毒性。另一方面，非DA神经元中没有供体的毒性不受MPP^+的影响。以上结果表明，在培养的中脑细胞中，MPP^+具有选择性衰减DA神经元无毒性的耐药性的作用。因此，建议没有成为mpp^+的谷氨酸增强作用的关键因素。