東京女子医科大学

东京女子医科大学

基本信息

批准号：
06266217
负责人：
三谷昌平
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Tokyo Women's Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06266217/
关键词：
ニューロン分化決定転写因子 C.elegans

项目摘要

脳などの神経組織でニューロンが多様な分化を行なうメカニズムにおいて、神経系分化制御を担う転写因子のネットワークが重要な役割を果たしていると思われる。神経系の発生と構造の基本的な記載が充実している線虫C.elegansをモデル動物とし、特に、機械刺激受容ニューロンの分化に焦点を当て、lin-32、unc-86やmec-3遺伝子のカスケードおよびこれらとネットワーク的に作用する因子群を同定し、これらの作用様式を明らかにしてきた。しかしながら、このネットワーク中には分化決定機構の説明ができない細胞種が存在することから、未だ同定できていない因子が多数存在すると思われる。そこで、カスケードの中心的な役割を担う転写制御因子UNC-86の標的遺伝子を単離することで、この遺伝子制御機構の未知の部分を明らかにしていくことを目的としている。標的遺伝子単離の方法としては、KinzlerとVogelsteinによるWhole Genome PCR法を用いた。現在までに、約120のクローンの独立したDNA断片が得られている。これらのDNA断片のほとんどはUCN-86の標的として既知のmec-3制御領域とほぼ同等のUNC-86結合活性を有していることが分かった。線虫ゲノムのシークエンスプロジェクトによって登録済みのコスミド配列(全ゲノムの数%)を検索し、7個の該当部位を見い出した。このうち、5クローンは遺伝子の制御領域と成りえる部位に存在し、さらに発現解析を行う予定である。これらの遺伝子は既知の蛋白質と相同性の認められない(またはとても低い)蛋白質をコードしていた。

控制神经系统分化的转录因子网络似乎在神经组织（例如大脑）中神经元以各种方式分化的机制中发挥着重要作用。使用具有详细记录的神经系统基本结构的线虫，我们专注于机械感觉神经元的分化，包括 lin-32、unc-86 和 mec-3，我们已经确定了基因级联和因子。以网络方式与他们互动，并明确他们的行动方式。然而，由于该网络中存在无法解释决定分化机制的细胞类型，因此认为还有许多因素尚未确定。因此，通过分离在级联中发挥核心作用的转录调节因子UNC-86的靶基因，我们的目标是阐明该基因控制机制的未知部分。作为目标基因分离的方法，使用Kinzler和Vogelstein的全基因组PCR方法。迄今为止，已获得约120个克隆的独立DNA片段。大多数这些 DNA 片段被发现具有几乎与 mec-3 调控区相同的 UNC-86 结合活性，而 mec-3 调控区已知是 UCN-86 的靶点。我们通过秀丽隐杆线虫基因组测序项目搜索了已注册的粘粒序列（占总基因组的百分之几），并发现了七个相关位点。其中，5个克隆存在于可能是基因控制区域的位点，我们计划进一步分析它们的表达。这些基因编码的蛋白质与已知蛋白质没有（或非常低）同源性。