ニューロン細胞種決定に寄与するMec-3蛋白質の下流遺伝子制御機構の解析

有助于神经细胞类型决定的Mec-3蛋白下游基因调控机制分析

基本信息

批准号：
06780661
负责人：
三谷昌平
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Tokyo Women's Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06780661/
关键词：
ニューロン分化決定転写因子 C-elegans

项目摘要

脳などの神経組織でニューロンが多様な分化を行なうメカニズムにおいて、神経系分化制御を担う転写因子のネットワークが重要な役割を果たしていると思われる.神経系の発生と構造の基本的な記載が充実している線虫C.elegansをモデル動物とし、特に、機械刺激受容ニューロンの分化に焦点を当て、lin-32、unc-86やmec-3遺伝子のカスケードおよびこれらとネットワーク的に作用する因子群を同定し、これらの作用様式を明らかにしてきた.しかしながら、このネットワーク中には分化決定機構の説明ができない細胞種が存在することから、未だ同定できていない因子が多数存在すると思われる.そこで、カスケードの中心的な役割を担う転写制御因子UNC-86の標的遺伝子を単離することで、この遺伝子制御機構の未知の部分を明らかにしていくことを目的としている.標的遺伝子単離の方法としては、KinzlerとVogelsteinによるWhole Genome PCR法を用いた.現在までに、約120のクローンの独立したDNA断片が得られている.これらのDNA断片のほとんどはUNC-86の標的として既知のmec-3制御領域とほぼ同等のUNC-86結合活性を有していることが分かった.線虫ゲノムのシークエンスプロジェクトによって登録済みのコスミド配列(全ゲノムの数%)を検索し、7個の該当部位を見い出した.このうち、5クローンは遺伝子の制御領域と成りえる部位に存在し、さらに発現解析を行う予定である.これらの遺伝子は既知の蛋白質と相同性の認められない(またはとても低い)蛋白質をコードしていた.

控制神经系统分化的转录因子网络似乎在神经组织（例如大脑）中神经元以各种方式分化的机制中发挥着重要作用。本书丰富了对神经系统发育和结构的基本描述。以线虫秀丽隐杆线虫为模型动物，我们重点关注机械感觉神经元的分化，并研究了 lin-32、unc-86 和 mec-3 基因级联以及在网络中与它们相互作用的因素以及这些因素如何相互作用。效果起作用。然而，由于该网络中存在无法解释决定分化机制的细胞类型，因此可能有许多因素尚未通过分离转录调节因子UNC-86的靶基因来确定。负责整体基因组采用PCR方法，目前已获得约120个克隆的独立DNA片段。这些DNA片段大部分含有UNC，几乎相当于mec-3控制区，是UNC-86的已知靶点—— 86 结合活性。作为线虫基因组测序项目的结果，我们搜索了注册的粘粒序列（占总基因组的百分之几），发现其中有5个克隆位于可能是基因控制区域的位点，我们计划进行进一步的表达分析，是的，这些基因编码蛋白质。与已知蛋白质没有（或非常低）同源性。