ニューロン細胞種決定に関与する転写制御因子の同定と機能解析

参与神经细胞类型决定的转录调节因子的鉴定和功能分析

基本信息

批准号：
05273219
负责人：
三谷昌平
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Tokyo Women's Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05273219/
关键词：
ニューロン細胞種転写制御因子 C.elegans

项目摘要

(1)mec-3遺伝子の発現解析による、遺伝子ネットワークにおけるおのおのの遺伝子の作用様式の決定:C.elegansの弱い機械的刺激に対する反応を司るTouch receptor neuronsの分化決定において、LIM-homeodomain転写因子MEC-3および協同因子群が必要である.これらの遺伝子間の制御様式を明らかにするため、mec-3-lacZ融合遺伝子の発現パターンをmec-3-lacZの発現が異所性に見られるか否か、消失が起こるか否かを検索することにより、協同因子の変異体のバックグランドで解析した.協同因子群のうち、egl-44とegl-46遺伝子はMEC-3がmec-7遺伝子を活性化するのをrepressすることにより機能していること、sem-4遺伝子の機能は、POU-homeodomain転写因子UNC-86がmec-3遺伝子の活性化を行うのをrepressしていることであること、lin-4とlin-14遺伝子は、mec-3遺伝子の下流で作用する(因子の発現調節を行う)ことにより、AVM/PVMとPVDニューロンの分化決定を行っていることなどが明らかになった.(2)mec-3遺伝子のターゲット遺伝子のクローニングの試み:触覚受容ニューロンの分化決定に関与するmec-3遺伝子は、下流遺伝子や他の分化決定遺伝子と相互作用を行いつつ、機能していることが予想される.遺伝学的手法で同定できなかった因子を探すために、mec-3遺伝子のターゲット遺伝子のクローニングを試みている.線虫ゲノムDNAを抗MEC-3抗体で免疫沈降して得られたDNA断片をクローン化し、塩基配列決定を行った.現在までに、2種のMEC-3結合コンセンサス配列(約300bpに2カ所)を有するクローンを得ている.これらの遺伝子についての解析を進めている.

(1)通过mec-3基因的表达分析确定基因网络中各基因的作用模式：触摸受体，控制线虫对微弱机械刺激的反应LIM-同源域转录因子MEC-3和一组协同因子是决定神经元分化所必需的，在协同因子突变体的背景下分析-lacZ的表达，寻找是否异位观察到表达以及是否发生其消失。在同一因子组中，egl-44和egl-46基因通过抑制MEC-3对mec-7基因的激活发挥作用，而sem-4基因的功能是POU-同源域转录因子UNC-86。抑制mec-3基因的激活，lin-4和lin-14基因位于mec-3基因下方。已经清楚AVM/PVM和PVD神经元的分化是通过作用于流（调节因子的表达）来决定的（2）尝试克隆mec-3基因的靶基因：mec-3基因，它参与决定触觉感受器神经元的分化，预计在与下游基因和其他分化决定基因相互作用的同时发挥作用。遗传方法我们正在尝试克隆mec-3基因的靶基因，以寻找在测序中无法鉴定的因子。迄今为止，我们已经获得了具有两种类型的MEC-3结合共有序列（两个位置）的克隆。大约 300 bp）我们正在对这些基因进行分析。