0ー結合糖鎖の修飾不全をひきおこすゴルジ複合体における選別輸送の遺伝変異

高尔基复合体选择性运输的遗传变异导致 0-连接糖链的修饰缺陷

基本信息

批准号：
03264216
负责人：
桑野信彦
金额：
$ 1.15万
依托单位：
大分医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度,我々は,1.ゴルジ領域に関する体細胞遺伝変異株について解析した結果,低比重リポ蛋白(LDL)受容体のLDL結合ドメイン附近の0ー糖鎖が欠失した結果,LDLの結合活性が著明に低下していることを観察した。すなわち,LDL受容体の0ー糖鎖構造がその機能に必要であることを明らかにした。2.マクロファ-ジ細胞でゴルジ領域内で合成・成熟したLDL受容体はゴルジ領域をでたあとすみやかに崩壊することを,マウスおよびヒトのマクロファ-ジ様細胞を用いて観察した。このことは,マクロファ-ジ細胞膜におけるLDL受容体の発現の制御に同受容体の安定性が関与している事を示唆している。3.LDL受容体のシアル酸添加はゴルジ体領域で生じるが,上皮増殖因子(EGF)受容体のシアル酸添加はトランスゴルジネットワ-ク領域で進む可能性を,ブレフェルジンAを用いて示唆した。4.ヒト癌KB細胞から安定なブレフェルジンA耐性株KB/BFー1及びKB/BFー2を単離した。同耐性株においてはゴルジ体の構造が変化していることを電顕学的に観察している。蛋白分泌や受容体の合成・成熟について検索を進めている。今後,ゴルジ領域の選別膜輸送における機能について同領域の変異株を駆使して研究を進めていきたい。

今年，我们分析了与高尔基区区域有关的体细胞基因突变体，并观察到，由于低密度脂蛋白（LDL）受体的LDL结合结构域附近的零聚糖的缺失，LDL的结合活性显着降低。换句话说，揭示了LDL受体的零糖基化结构是其功能所必需的。 2。我们观察到，巨噬细胞使用小鼠和人类巨噬细胞样细胞合成和成熟的LDL受体迅速崩溃。这表明同一受体的稳定性参与了巨巴迪细胞膜中LDL受体表达的调节。 3。唾液酸的添加LDL受体发生在高尔基区域，而唾液酸则使用Brefeldin a在反式高尔基网络区域中添加表皮生长因子（EGF）受体。 4。从人类癌症KB细胞中分离出稳定的Brefeldin A-抗性菌株KB/BF-1和KB/BF-2。从电子显微镜上观察到高尔基体的结构在抗性应变中发生变化。我们目前正在寻找蛋白质分泌和受体合成和成熟。将来，我们希望继续研究使用同一区域中的突变体在高尔基亚区域中选择性膜运输的功能。