樹状細胞由来細胞外小胞の免疫機能の最大化並びに動態制御に基づくワクチン療法開発

基于最大化免疫功能和控制树突状细胞来源的细胞外囊泡动态的疫苗疗法的开发

基本信息

批准号：
21H02616
负责人：
高倉喜信
金额：
$ 11.07万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02616/
关键词：
細胞外小胞エクソソーム樹状細胞

项目摘要

細胞から分泌されるエクソソームをはじめとした細胞外小胞（Extracellular Vesicles; EV）は、産生細胞に由来した物質を含有する内因性の物質輸送機構として機能している。樹状細胞（Dendritic cells; DC）由来のEVはDCに由来した種々の免疫関連分子を含むことから抗原特異的な免疫応答の誘導を可能とするワクチン療法への応用が期待されている。これを実現するためには、抗原を搭載した高い免疫機能を有するEVの調製、また投与したEVの免疫機能を最大限に発揮させるための動態制御法の確立が必要であるが、いずれの課題も十分に解決されてはいない。本研究では、①高い免疫機能を有する抗原搭載DC由来EVの調製法の確立、②DC由来EVの免疫機能発現に適した動態特性を提供可能な動態制御法の開発を行い、開発した両技術を統合して、③高い免疫機能を有するDC由来EVの動態制御を基盤としたワクチン療法の開発を目指した。本年度は、DC由来のEVの動態制御を可能とするゼラチン微粒子の調製について検討した。その結果、水相二相分離法にて、メタクリル酸修飾したゼラチンエマルジョンの作成時にEVを添加しておくことで、EVを含有する微小液滴の調製が可能であり、さらにこれにUVを照射することでメタクリル酸の架橋によるゼラチン微粒子の形成と、それへのEVへの搭載が可能であった。さらにゼラチン微粒子に搭載されたEVは、微粒子から1週間ほどかけて徐放された。以上、EVの徐放を可能とするゼラチン微粒子の調製法の確立に成功した。

细胞分泌的细胞外囊泡（EV），包括外泌体，充当内源性物质运输机制，含有来自生产细胞的物质。源自树突状细胞（DC）的EV含有多种源自DC的免疫相关分子，因此有望应用于可诱导抗原特异性免疫反应的疫苗疗法。为此，需要制备负载抗原并具有高免疫功能的EV，并建立动态控制方法以最大限度地发挥所施用的EV的免疫功能尚未完全解决。在这项研究中，我们将（1）建立一种制备具有高免疫功能的负载抗原的DC衍生EV的方法，以及（2）开发一种动力学控制方法，该方法可以提供适合DC-免疫功能表达的动力学特征总的来说，我们的目标是（3）开发一种基于动态控制 DC 衍生 EV 的疫苗疗法，其具有高免疫功能。今年，我们研究了明胶微粒的制备方法，该微粒能够控制直流电动汽车的动力学。结果，通过在使用水两相分离法制备甲基丙烯酸改性明胶乳液时添加EV，可以制备含有EV的微滴，然后可以用UV照射该微滴。通过交联甲基丙烯酸形成明胶微粒并将其装载到电动汽车上。此外，负载在明胶微粒上的EV在大约一周的时间内从微粒中缓慢释放。如上所述，我们成功建立了一种能够持续释放EV的明胶微粒的制备方法。