プラスミド水溶液投与による高効率遺伝子導入法を利用したがんのサイトカイン療法

使用质粒水溶液给药的高效基因转移方法进行癌症细胞因子治疗

基本信息

批准号：
15025230
负责人：
高倉喜信
金额：
$ 2.43万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ハイドロダイナミクス法の原理を利用したサイトカイン遺伝子導入によるがん遺伝子治療において、投与する遺伝子医薬品の最適化を目的に種々の検討を行った。まず、ハイドロダイナミクス法による遺伝子デリバリーメカニズムの解明を試みた。過剰量の非発現プラスミドDNAあるいは種々のポリアニオン共存下での静脈内投与時にも遺伝子発現量への影響が見られなかった。細胞膜非透過性の核染色蛍光物質がハイドロダイナミクス投与時に効率的に肝細胞内に取り込まれること、あらかじめ細胞質に発現させたGFPがハイドロダイナミクス法の適用により顕著に肝臓から消失することが明らかとなり、細胞膜の一時的な透過性亢進が示唆された。さらに、本法による遺伝子デリバリーが細胞膜の透過性亢進が見られる投与後初期の短時間(5〜15分程度)に起こる現象であることが示唆された。以上の結果より、ハイドロダイナミクス法による効率的なプラスミドDNAのデリバリーが、細胞膜の一時的な透過性亢進を伴う非特異的な細胞質への直接導入であることが示された。また、ポリスチレンマイクロスフィアーを用いた検討から本法に適用可能な粒子サイズに関する情報も得られた。これらの知見は、今後ハイドロダイナミクス法の原理を利用したがんの遺伝子治療において最適な遺伝子医薬品を開発する上での有用な情報を提供するものと考えられる。

使用水电动力学原理，使用细胞因子基因对癌症遗传治疗进行了各种研究。首先，我们试图通过水电动力学方法阐明基因输送机理。在静脉内给药过程中未发现对基因表达的影响。显然，细胞膜不可渗透的核阳性荧光物质在水力动力学期间有效地掺入肝细胞中，并且由于水力动力学方法的应用，提前在细胞中表达的GFP明显在细胞中表达。提出了细胞膜的暂时增加。此外，有人认为，当观察细胞膜的渗透性时，根据该定律的基因递送（约5-15分钟），可以看到细胞膜的渗透性。上述结果表明，通过临时增生细胞膜的非特异性细胞直接引入了通过水力动力学方法传递的有效质粒DNA。此外，使用Polystrain Microsfear从检查中获得了有关应用于该定律的粒径的信息。这些发现被认为可以使用未来的水力动力学原理来开发最佳遗传药物在癌症治疗中的最佳遗传药物。