腫瘍融解アデノウイルスのエクソソームを介した全身性免疫賦活効果の検討

溶瘤腺病毒外泌体介导的全身免疫刺激作用的检查

• 批准号: 22K16512
• 负责人: 垣内 慶彦
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16512/
• 关键词: エクソソーム; 細胞外小胞; 腫瘍融解アデノウイルス; 樹上細胞; ウイルス療法; ドラッグデリバリーシステム; 樹状細胞

当教室では臨床応用を目指して腫瘍融解アデノウイルス（OBP-301）を開発し、さらにp53を組み込んだより強力な抗腫瘍効果を有するOBP-702を開発した。これらのアデノウイルスを用いたがんウイルス療法は、局所投与による強力な抗腫瘍効果を有する画期的な治療法であり、治療後の全身性抗腫瘍免疫の賦活が期待される。エクソソームはすべての組織・臓器から分泌される約30-150nm程度の小胞体で、分泌細胞由来のmRNA、miRNA、DNA、タンパク質などが含まれている。また、細胞間伝達において大きな役割を担っているとされ、さらに特筆すべき特徴として腫瘍指向性を持つと言われている。OBP-301での治療後にOBP-301がエクソソームを介して未治療腫瘍において抗腫瘍効果を引き起こすことはすでに確認しており、この際に引き起こされた抗腫瘍効果は、アポトーシスなどに代表されるOBP-301による直接的な効果であった。一方、申請者らは過去に腫瘍融解アデノウイルスが免疫細胞死（Immunogenic Cell Death：ICD）を引き起こすことも確認している。これらの知見から、腫瘍融解アデノウイルスでの治療後にウイルスがエクソソームを介して引き起こす効果には、直接的な効果以外に、免疫賦活に伴う間接的な効果も存在する可能性を考えた。本研究では、OBP-702で治療した腫瘍細胞から分泌されるエクソソームにOBP-702が搭載されている（Exo-702）ことを確認した。またExo-702を未成熟樹状細胞に投与することでその活性化に促進することを確認した。さらに免疫のあるマウス骨髄細胞から得た未成熟樹状細胞にExo702を投与することで樹状細胞が活性化されることを同様に確認するに至った。

我们的教室开发了肿瘤裂解的腺病毒（OBP-301），其目的是临床应用，并且还开发了OBP-702，其中包含p53，p53具有更强的抗肿瘤作用。使用这些腺病毒的癌症病毒疗法是一种开创性的治疗，局部给药具有强大的抗肿瘤作用，预计将在治疗后刺激全身抗肿瘤免疫。外泌体是从所有组织和器官分泌的约30-150 nm的内质网，并包含来自分泌细胞的mRNA，miRNA，DNA，蛋白等。据说它在细胞到细胞的传播中起主要作用，并且更值得注意的特征是它具有肿瘤方向性。已经证实，OBP-301在用OBP-301处理后通过外泌体引起未处理肿瘤的抗肿瘤作用，此时引起的抗肿瘤作用是OBP-301的直接作用，例如细胞凋亡。同时，申请人还确认溶瘤腺病毒会导致免疫细胞死亡（ICD）。从这些发现中，我们认为，通过肿瘤裂解腺病毒治疗后外泌体引起的病毒的间接作用，除了直接作用外，还可能与免疫刺激有关。在这项研究中，我们证实了OBP-702在用OBP-702处理的肿瘤细胞中分泌的外泌体中携带（Exo-702）。还证实，对未成熟的树突状细胞施用Exo-702会促进其激活。此外，还证实，还将施用从免疫小鼠骨髓细胞获得的未成熟树突状细胞给药以激活树突状细胞。