腫瘍形成に宿主プロトン感知性受容体は関与しているか～受容体欠損マウスを用いた解析

使用受体缺陷小鼠进行分析是否涉及宿主质子敏感受体？

• 批准号: 22659014
• 负责人: 岡島 史和
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22659014/
• 关键词: 細胞外pH; プロトン感知性受容体; マクロファージ; TDAG8; 腫瘍形成; サイトカイン

腫瘍形成には酸性化(低pH)が伴う。これは酸素供給の低下を反映した解糖系の亢進による乳酸産生の増加に基づく。本研究では、最近同定されたプロトン感知性G蛋白質共役受容体が酸性化(低pH)を伴う腫瘍形成に関わっているかについて解析した。細胞レベルの解析(1)マウスの大動脈リングをマトリゲル内で培養し、血管内皮細胞の増殖活性に対する細胞外pH効果を調べた。細胞外pH低下は増殖活性を低下させたので、プロトン感知性受容体欠損マウス由来の血管を用い受容体の同定を目指している。(2)マウスのマクロファージではリポポリサッカライド(LPS)によって種々の細胞障害性のサイトカイン(TNF-aやIL-6など)を産生する。この作用は細胞外pHを低下すると抑制される。我々はこのpH効果はTDAG8の受容体欠損マウス由来では減弱していることを確認している。他の受容体の関与を調べるため、OGR1欠損マウス由来、G2AのsiRNAによるノックダウン細胞で調べたが、これらの受容体の関与は否定的であった。このように、TDAG8が主要なプロトン受容体であることが確認された。(3)マクロファージにはM1,M2タイプが存在し、腫瘍内では抗腫瘍活性の弱いM2タイプになり、腫瘍形成に対して促進的に機能していることが知られている。そこで、腫瘍内で観察される酸性pHがM1,M2変化に与える影響を調べた。その結果、酸性下ではM2タイプが有意になることが確認された。現在、その機構を解析している。個体レベルの腫瘍形成とOGR1ファミリー:(4)マウス由来癌細胞(LLC1、B16)を野生型、またはOGR1,TDAG8,GPR4欠損マウスの皮下に接種し、腫瘍の進展、サバイバルなどを調べた。その結果、欠損マウスの種類の違いにより腫瘍形成の程度に違いが観察された。このように、宿主のプロトン感知受容体は腫瘍形成に対して重要な役割をはたしていることが示唆された。

肿瘤形成伴随着酸化（低pH）。这是基于由于糖酵解增加而导致的乳酸产生增加，这反映了氧气供应的减少。在这项研究中，我们分析了最近鉴定出的质子感应G蛋白偶联受体是否参与酸化（低pH）的肿瘤发生。细胞水平分析（1）小鼠主动脉环在母质中培养，以研究细胞外pH值对血管内皮细胞增殖活性的影响。随着细胞外pH的减少降低增殖活性，我们旨在使用源自质子感应受体缺陷型小鼠的血管鉴定受体。 （2）小鼠巨噬细胞通过脂多糖（LPS）产生各种细胞毒性细胞因子（例如TNF-A和IL-6）。当细胞外pH降低时，这种效果被抑制。我们确认缺乏TDAG8受体的小鼠中这种pH值会减弱。为了研究其他受体的参与，我们研究了它们在OGR1缺陷小鼠的siRNA敲低细胞中，但这些受体的参与为阴性。因此，已经证实TDAG8是主要的质子受体。 （3）巨噬细胞具有M1和M2类型，在肿瘤中，它们变成了抗肿瘤活性弱的M2类型，并且已知可以主动起作用肿瘤发生。因此，我们研究了肿瘤中观察到的酸性pH的影响对M1和M2的变化。结果，已经证实M2类型在酸度下是显着的。目前，正在分析该机制。单个水平的肿瘤发生和OGR1家族：（4）在野生型或OGR1，TDAG8和GPR4缺陷型小鼠中，在野生型或OGR1，TDAG8和GPR4缺乏小鼠中次置了小鼠衍生的癌细胞（LLC1，B16），以检查肿瘤发育，生存等。结果，由于缺陷小鼠的类型差异，观察到肿瘤形成程度的差异。因此，有人提出宿主质子传感受体在肿瘤发生中起重要作用。

项目成果

リゾホスファチジン酸による血管内皮細胞のVEカドヘリンのトランスロケーション制御機構

溶血磷脂酸对血管内皮细胞VE-钙粘蛋白易位的调控机制

• 发表时间: 2010
• 作者: 加賀正基;渡部草太;平川城太朗;今井康之;川島博人;川端崇仁;木村孝穂
• 通讯作者: 木村孝穂

インスリン分泌における細胞外pHの影響とOGR1の役割

细胞外 pH 值的影响和 OGR1 对胰岛素分泌的作用

• 发表时间: 2010
• 作者: Shida H;Sue M;Komatsu N;Waki M;Nishimura Y;Nakajima M;Higashi N;Irimura T;中倉敬
• 通讯作者: 中倉敬

低密度リポタンパク質によるヒト冠状動脈平滑筋細胞の遊走と増殖におけるリゾボスファチジン酸の役割とそのシグナル伝達機構の解析

溶血磷脂酸在低密度脂蛋白诱导人冠状动脉平滑肌细胞迁移增殖中的作用及其信号转导机制分析

• 发表时间: 2010
• 作者: 前川正充;三澤靖;外浦亜耶子;坂本修;大浦敏博;虻川大樹;井上岳彦;大野耕策;武藤晃奈;武井一;入戸野博;小川祥二郎;柿山玄太;飯田隆;Alan F. Hofmann;後藤順一;島田美樹;眞野成康;小町麻由美
• 通讯作者: 小町麻由美

Lysophosphatidic acid inhibits CCL5/RANTES production by blocking IRF-1-mediated gene transcription in human bronchial epithelial cells.

溶血磷脂酸通过阻断人支气管上皮细胞中 IRF-1 介导的基因转录来抑制 CCL5/RANTES 的产生。

• 发表时间: 2010
• 期刊: J Immunol
• 影响因子: 4.4
• 作者: Matsuzaki S;Ishizuka T;Hisada T;Aoki H;Komachi M;Ichimonji I;Utsugi M;Ono A;Koga Y;Dobashi K;Kurose H;Tomura H;Mori M;Okajima F.
• 通讯作者: Okajima F.

細胞外pH環境を感知するプロトン感知性GPCRの機能と作用機構

感知细胞外pH环境的质子敏感GPCR的功能和作用机制

• 发表时间: 2010
• 期刊: 日本薬理学雑誌
• 作者: Goudarzi H;Iizasa H;Furuhashi M;Nakazawa S;Nakane R;Liang S;Hida Y;Yanagihara K;Kubo T;Nakagawa K;Kobayashi M;Irimura T;Hamada J;戸村秀明
• 通讯作者: 戸村秀明