がん細胞の浸潤、転移に対するリゾホスファチジン酸受容体標的薬剤の治療効果

溶血磷脂酸受体靶向药物对癌细胞侵袭转移的治疗作用

基本信息

批准号：
17016009
负责人：
岡島史和
金额：
$ 2.69万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

生理活性リゾ脂質とその受容休は生体に広く分布し細胞運動、接着、増殖、生存、アポトーシスなど細胞の基本的な生命活動を制御している。本研究は、リゾ脂質性シグナル分子による運動制御機構を調べ、その受容体機能を制御することによってがん治療の可能性を探ることを目的とする。(1)今後のリゾホスファチジン酸産生機構を調べるツールとなるLPA産生酵素オートタキシンの抗体を作成した。このオートタキシン抗体を用い、オートタキシンが脳脊髄液中に大量に存在すること、髄膜細胞から産生されることを明らかにした。このように、中枢神経系のLPA産生機構の一端が明らかにされた。今後、癌細胞からのLPA産生機構の解析に威力を発揮すると思われる。(2)グリオーマを用い、インビトロ遊走活性、浸潤活性に対するLPAアンタゴニストKi16425、さらにLPA受容体に特異的なsiRNAなど受容体を標的とした抗がん作用の有効性を検討した。初代培養アストロサイトではLPA受容体の発現が低く、LPAによって細胞遊走活性もほとんど観察されない。しかし、ラットC6グリオーマ、ヒトグリオーマ(GNS-3314、CGNH-89)、ヒトグリオブラストーマ患者の検体ではLPA1受容体の発現増強が観察され、LPAで著明な遊走活性が観察された。この細胞遊走、細胞浸潤活性はLPA受容体アンタゴニストKi16425、でほぼ完全に抑制された。また、細胞遊走はLPA1受容体に特異的なsiRNAで著明に抑制され、これらのグリオーマの細胞運動の亢進は発現増加したLPA1受容体を介していることが推定された。このLPA1受容体を介した細胞遊走、浸潤の細胞内シグナル伝達機構、特に、低分子G蛋白、MAPキナーゼに関して特異的な阻害剤、ドミナントネガティブなシグナル分子の発現実験などにより解析した。その結果、細胞運動の亢進はRac1/JNK系とCdc42/p38MAPK系の両経路が関わっていることが推定された。グリオーマは浸潤性の高いがん細胞であり、Ki16425、受容体特異的siRNAはグリオーマの細胞運動の制御に有効であることが示唆された。今後、インビボ実験でその有効性を実証する必要がある。

生物活性溶酶体及其受体被广泛分布在生物体中，并控制基本的细胞生命活动，包括细胞运动，粘附，增殖，生存和凋亡。这项研究旨在通过研究溶酶体信号分子的运动控制机制并控制其受体功能，从而探索癌症治疗的潜力。（1）我们创建了一种产生LPA的酶自动昔候的抗体，该抗体将作为研究未来溶血磷脂酸生产机制的工具。使用这种自身Xt蛋白抗体，揭示了自身蛋白酶在脑脊液中大量存在，并由脑膜细胞产生。通过这种方式，已经揭示了中枢神经系统LPA生产机制的一端。人们认为，它将有效地分析未来癌细胞的LPA生产机制。（2）使用神经胶质瘤，我们研究了针对抗癌作用受体（例如LPA拮抗剂ki16425）对体外迁移和侵入性活性的功效，以及特异于LPA受体的siRNA。在原代培养的星形胶质细胞中，LPA受体的表达较低，由于LPA，几乎没有观察到细胞迁移活性。然而，在大鼠C6神经胶质瘤的标本中，人神经胶质瘤（GNS-3314，CGNH-89）和人胶质母细胞瘤患者，观察到LPA1受体的表达增强，并在LPA中观察到明显的迁移活性。 LPA受体拮抗剂KI16425几乎完全抑制了这种细胞迁移和细胞浸润活性。此外，通过特异性LPA1受体的siRNA明显抑制细胞迁移，据估计，这些神经胶质瘤的细胞运动增加是通过LPA1受体的表达增加而介导的。分析是通过实验进行的，例如小G蛋白的表达，MAP激酶的特异性抑制剂以及显性阴性信号分子，包括通过LPA1受体的细胞迁移和侵袭机制。结果，估计Rac1/JNK系统和Cdc42/p38mapk系统都参与增强的细胞运动。神经胶质瘤是高度浸润性的癌细胞，认为Ki16425（一种受体特异性siRNA）被认为有效控制神经胶质瘤的细胞运动。将来有必要证明其在体内实验中的有效性。