スプライシング因子リン酸化酵素の活性制御機構

剪接因子激酶活性的控制机制

• 批准号: 12029208
• 负责人: 萩原 正敏
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12029208/
• 关键词: RNA結合蛋白; SF2; SRPK; 線虫

転写反応は転写調節因子のSer/Thr/Tyrのリン酸化によって制御されていることが、判明しつつあるが、RNA processingの段階においても、リン酸化反応がRNA結合蛋白群の様々な活性を調節していると予想される。我々は最近、SF2を含むSR蛋白のSerのリン酸化を行う酵素群に注目し、それらの機能とシグナル制御機構を追求している。SF2に関しては、cdc2、SRPK1&2、Clk/Sty1-4、PRP4などがリン酸化する。これらのリン酸化酵素はRNA processingにおいて異なった機能を分担していると考えられるが、生化学的解析、遺伝子破壊実験や特異的阻害剤探索などによりその一端が判明した。C.elegans(線虫)には5種類のSR蛋白が存在するが、そのリン酸化酵素はSRPK様の酵素(Spk1と名付けた)が存在するだけである。dsRNAを用いてSpk1発現を阻害したところ、胚性致死と不捻の2種の表現型を示した。Spk1をコードする母性RNAが存在する間は胚性致死を免れ、その後生殖巣形成が不十分で不捻となること、母性RNAの存在が不十分な時は胚性致死となることが判明した。このように、線虫を用いいた実験によりSRPKは発生および生殖巣形成に関与することが示唆された。

显而易见的是，转录反应是通过转录调节因子ser/thr/tyr的磷酸化控制的，但是可以预期，在RNA处理阶段，磷酸化反应还可以调节RNA结合蛋白基团的各种活性。我们最近专注于磷酸化SR蛋白（包括SF2）的SER的酶，并追求其功能和信号调节机制。关于SF2，CDC2，SRPK1和2，CLK/STY1-4，PRP4等。这些磷酸烯酶被认为在RNA处理中具有不同的功能，并且通过生化分析，基因破坏实验和寻找特定抑制剂来揭示了一些因素。秀丽隐杆线虫（Neuropeans）具有五种类型的SR蛋白，但磷酸酶仅是SRPK样酶（命名为SPK1）。当使用DSRNA抑制SPK1表达时，它显示了两种表型：胚胎致死和无形。发现编码SPK1的母体RNA是幸运的胚胎致死性，随后形成性腺和不足的无形性，并且产妇RNA的存在不足以胚胎致死性。因此，使用线虫的实验表明SRPK参与了发育和性腺形成。

项目成果

Kuroyanagi,H.,Kimura,T., Hagiwara,M., at al: "SPK-1,aC.elegans SR.Proteins kinase homologue, is essential for embryogenesis and required for geneline development."Mech.Dev.. 99. 51-64 (2000)

Kuroyanagi,H.、Kimura,T.、Hagiwara,M.等人：“SPK-1，aC.elegans SR.蛋白质激酶同源物，对于胚胎发生至关重要，并且是基因发育所必需的。”Mech.Dev.. 99。

Muro,Y.,Kamimoto,T.,Hagiwara M, et.al: "Spectrum of autoantibodies against a dynamin-related protein, dymple."Arthritis & Rheumatism.. 43(7). 1516-1519 (2000)

Muro,Y.、Kamimoto,T.、Hagiwara M 等人：“针对动力相关蛋白 dymple 的自身抗体谱。”关节炎

Inoae K.,Mizuno T.,Wada K.Hagiwara,M., et.al: "Novel RING finger proteins, Air1p and 2p interact with Hmtlp and Inhibit the arginine methylation of Npl.3p."J.Biol.Chem.. 275(42). 32793-32799 (2000)

Inoae K.、Mizuno T.、Wada K.Hagiwara,M. 等人：“新型环指蛋白、Air1p 和 2p 与 Hmtlp 相互作用并抑制 Npl.3p 的精氨酸甲基化。”J.Biol.Chem..

Usukura,J.Nishizawa,Shimomura A,Hagiwara,M. et.al: "Direct imaging of phosphorylation dependent congormational change and DNA binding of CREB by electron microscopy."Genes to Cells. 5. 515-522 (2000)

薄仓，西泽，下村A，萩原，M。

Nagai,Y.,Miyazaki,M.,Aoki,R.Hagiwara,M. et.al: "A fluorescent indicator for visualizing cAMP-induced phosphorylation in vivo."Nat.Biotechnol.. 18. 313-316 (2000)

永井Y.、宫崎M.、青木R.萩原M.