スプライシング因子リン酸化酵素の活性制御機構

剪接因子激酶活性的控制机制

• 批准号: 12029208
• 负责人: 萩原 正敏
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12029208/
• 关键词: RNA結合蛋白; SF2; SRPK; 線虫

転写反応は転写調節因子のSer/Thr/Tyrのリン酸化によって制御されていることが、判明しつつあるが、RNA processingの段階においても、リン酸化反応がRNA結合蛋白群の様々な活性を調節していると予想される。我々は最近、SF2を含むSR蛋白のSerのリン酸化を行う酵素群に注目し、それらの機能とシグナル制御機構を追求している。SF2に関しては、cdc2、SRPK1&2、Clk/Sty1-4、PRP4などがリン酸化する。これらのリン酸化酵素はRNA processingにおいて異なった機能を分担していると考えられるが、生化学的解析、遺伝子破壊実験や特異的阻害剤探索などによりその一端が判明した。C.elegans(線虫)には5種類のSR蛋白が存在するが、そのリン酸化酵素はSRPK様の酵素(Spk1と名付けた)が存在するだけである。dsRNAを用いてSpk1発現を阻害したところ、胚性致死と不捻の2種の表現型を示した。Spk1をコードする母性RNAが存在する間は胚性致死を免れ、その後生殖巣形成が不十分で不捻となること、母性RNAの存在が不十分な時は胚性致死となることが判明した。このように、線虫を用いいた実験によりSRPKは発生および生殖巣形成に関与することが示唆された。

越来越清楚的是，转录反应是由转录调节因子Ser/Thr/Tyr的磷酸化控制的，但预计磷酸化反应也在RNA加工阶段调节RNA结合蛋白的各种活性。我们最近关注了一组磷酸化 SR 蛋白（包括 SF2）上 Ser 的酶，并正在研究它们的功能和信号控制机制。关于SF2，CDC2、SRPK1&2、Clk/Sty1-4、PRP4等被磷酸化。这些磷酸化酶被认为在 RNA 加工中具有不同的功能，其中一些已通过生化分析、基因破坏实验和寻找特定抑制剂得到阐明。线虫中有五种类型的 SR 蛋白，但只有一种 SRPK 样酶（称为 Spk1）作为磷酸化酶存在。当使用 dsRNA 抑制 Spk1 表达时，观察到两种表型：胚胎致死和胚胎失败。研究发现，只要存在编码Spk1的母体RNA，就可以避免胚胎致死，但此后，性腺形成不足且变得不扭曲，当母体RNA不充分存在时，就会发生胚胎致死。因此，使用线虫的实验表明 SRPK 参与发育和性腺形成。

项目成果

Kuroyanagi,H.,Kimura,T., Hagiwara,M., at al: "SPK-1,aC.elegans SR.Proteins kinase homologue, is essential for embryogenesis and required for geneline development."Mech.Dev.. 99. 51-64 (2000)

Kuroyanagi,H.、Kimura,T.、Hagiwara,M.等人：“SPK-1，aC.elegans SR.蛋白质激酶同源物，对于胚胎发生至关重要，并且是基因发育所必需的。”Mech.Dev.. 99。

Inoae K.,Mizuno T.,Wada K.Hagiwara,M., et.al: "Novel RING finger proteins, Air1p and 2p interact with Hmtlp and Inhibit the arginine methylation of Npl.3p."J.Biol.Chem.. 275(42). 32793-32799 (2000)

Inoae K.、Mizuno T.、Wada K.Hagiwara,M. 等人：“新型环指蛋白、Air1p 和 2p 与 Hmtlp 相互作用并抑制 Npl.3p 的精氨酸甲基化。”J.Biol.Chem..

Muro,Y.,Kamimoto,T.,Hagiwara M, et.al: "Spectrum of autoantibodies against a dynamin-related protein, dymple."Arthritis & Rheumatism.. 43(7). 1516-1519 (2000)

Muro,Y.、Kamimoto,T.、Hagiwara M 等人：“针对动力相关蛋白 dymple 的自身抗体谱。”关节炎

Ueda,H.R.,Hagiwara,M.,Kitaro,H. et al: "Robust oscillations within the interlocked feedback model of drosophila circadian rhythm."J.Theo.Biol.. (in press). (2001)

上田 H.R.、萩原 M.、喜多郎 H.

Usukura,J.Nishizawa,Shimomura A,Hagiwara,M. et.al: "Direct imaging of phosphorylation dependent congormational change and DNA binding of CREB by electron microscopy."Genes to Cells. 5. 515-522 (2000)

薄仓，西泽，下村A，萩原，M。