核内受容体の細胞質・核間輸送および発癌性からみた内分泌攪乱メカニズムの解析

从核受体胞质/核转运及致癌性角度分析内分泌干扰机制

基本信息

批准号：
13027291
负责人：
川尻要
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Research Institute for Clinical Oncology, Saitama Cancer Center
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13027291/
关键词：
内分泌撹乱物質 TCDD AhR ARNT CYP1A1 核移行核外輸送 DNAチップ

项目摘要

1.生殖腺形成に関与する転写因子の細胞質・核間輸送の調節機構の解析ダイオキシンの複合的な生物機能への影響を解析するために、性分化関連因子でありステロイドホルモン合成を調節するSF-1とその抑制作用を示すDax-1の細胞内での相互作用について検討した。その結果、Dax-1はSF-1と結合してSF-1のNLSを利用して核に移行すること、SF-1との結合にはDax-1の最もN端に近いNR box 1が関与すること、これらの複合体の核への移行にはC端に存在しているAF2ドメインも重要であること、AF2ドメインに変異のある先天性副腎低形成(AHC)患者のDAX-1はSF-1依存的な核移行活性が非常に低下していることが示された。従って、正常なDAX-1の細胞内局在性が変異により乱されることにより遺伝性疾患AHCの原因の一部になることが示唆された。2.DESの発がんに関与する標的遺伝子の同定内分泌攪乱物質の影響の受け方には、個人差があり遺伝的背景が関与していると思われる。この仮説をラットを用いQTL(quatntitative trait loci)分析により証明することを試みた。まずF344とLong Evansの交配により、32系列のrecombinant inbred(RI)ラットを作成しマイクロサテライトマーカーを用いたPCR法によりstrain distribution pattern(SPD)表を作成した。ついで内分泌攪乱物質のひとつである非ステロイド系エストロゲン作用物質diethlystillbestrol(DES)約17mgをポリスチレンチューブに封入し、生後4週間の雄性ラットの皮下にうめこんだ。8週間後に、睾丸重量を測定した。重量は各RI系で異なり、Map Managerソフトを用いQTL解析したところ、ラット第7染色体に連鎖することがわかった。すなわちDESによる睾丸委縮の程度には連鎖座位付近の遺伝子の多型が関与していることが示唆された。

1。为了分析涉及生殖腺形成的转录因子分析的影响，以及分析转录因子机理的分析以及间歇性交易机制，SFO特异性因子和类固醇激素合成调整了DAX-1的相互作用，该相互作用表明1及其抑制作用。结果，DAX-1是与SF-1结合使用SF-1的NLS到核武器，而NR Box 1（最接近DAX-1的N端）与SF-1一起加入. The involvement, the AF2 domain existing at the E-end is also important for the transition of these complexes to the nucleus, the DAX-1 in the congenital adrenal adrenal formation (AHC) patient with a mutation in the AF2 domain. It was表明SF-1依赖性的核转移活性显着降低。因此，有人提出通常DAX-1细胞受到突变的干扰，这可能是遗传病AHC原因的一部分。 2。接收涉及癌变的靶基因相同内分泌干扰物质的影响可能与遗传背景有关。我试图通过使用大鼠来证明这一假设，并通过QTL（QTL（quatnntitative Trait loat lot）分析）进行分析。首先，通过在F344和Long Evans之间进行跨越，创建了一个32列重组的inbbled（RI）大鼠，并创建了使用微卫星标记的PCR方法。另外，基于非类药物的非基于雌激素的物质是内分泌干扰物质之一，被封闭在多态大张李恩氏菌中，在多晶式大麻中约为17毫克，并用于皮下雄性大鼠。八周后，测量了睾丸重量。每个RI系统的重量都不同，并且使用MAP Manager软件的QTL分析表明，它已链入大鼠第七染色体。换句话说，有人提出，d的睾丸程度参与了链座附近的基因。