抗癌剤で活性化される転写因子を標的とした薬剤開発に向けた基礎研究

针对抗癌药物激活转录因子的药物开发基础研究

基本信息

批准号：
11140276
负责人：
河野公俊
金额：
$ 3.2万
依托单位：
University of Occupational and Environmental Health, Japan
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11140276/
关键词：
YB-1 NF-κB AP-1 CTF NF-1 p53 HMG1 STAT3 IL13-Rα1

项目摘要

研究計画は、1.プロモーター解析と2.転写因子解析の2本柱でスタートしたが、前者については新規プロモーター単離と機能解析で大きく進展できたが、後者については既知の転写因子解析のみにとどまり、若干の不満があるものの新しい発見がいくつかあり今後の課題として残された。平成11年度明らかにした点は以下である。1.(1)損傷DNAを認識するHMG1の遺伝子プロモーター構造及び、シスプラチン耐性細胞での過剰発現の分子を明らかにした。(2)シスプラチン耐性細胞で過剰発現しているSTAT3及びIL13-Rα1遺伝子のプロモーター構造及び、転写制御について解析した。(3)薬剤耐性遺伝子としてMRP2のプロモーターの構造機能解析を行った。2.(1)YB-1の発現を臨床試料(卵巣癌42例、大腸癌26例)で解析し、増殖や予後との関連を明らかにした。(2)抗癌剤でNF-kBが活性化されること、AP-1がグルタチオン関連のレドックス制御を受けること、シスプラチン耐性細胞でCTF/NF-1が過剰発現していることを明らかにした。(3)YB-1やHMG1が癌抑制遺伝子p53と分子会合することを発見し、その意義について現在検討している。今後はプロモーター解析による新規転写因子のクローン化による同定と既知の転写因子を含めた蛋白・蛋白会合の核内マップを作成することが、増殖、アポトーシス、耐性化との関連から最も有力な分子標的を明らかにしていく上で大切と考えられる。現在、酵母ワンハイブリッドシステムの導入を進めており、新規の転写因子の同定に向けて研究を継続している。更に、抗癌剤で発現誘導される遺伝子の単離を目指して、ディファレンシャルディスプレイ法を行い新しい遺伝子の同定も進めており、そのプロモーター解析も着実に進展している。

研究计划从两个支柱开始：1.启动子分析和2.转录因子分析，虽然我们通过新启动子的分离和功能分析在前者方面取得了很大进展，但在后者中我们只分析了已知的转录因子。尽管存在一些不满，但还是取得了一些新发现，这些仍然是未来的问题。 1999年澄清了以下几点。 1.(1)我们阐明了识别受损DNA的HMG1基因启动子结构，以及导致其在顺铂耐药细胞中过度表达的分子。 (2)分析了顺铂耐药细胞中过表达的STAT3和IL13-Rα1基因的启动子结构和转录调控。 (3)我们对耐药基因MRP2的启动子进行了结构和功能分析。 2.(1)我们分析了临床样本（42例卵巢癌和26例结直肠癌）中YB-1的表达情况，并阐明其与增殖和预后的关系。 (2)我们发现NF-kB被抗癌药物激活，AP-1受到谷胱甘肽相关的氧化还原调节，CTF/NF-1在顺铂耐药细胞中过度表达。 (3)我们发现YB-1和HMG1与抑癌基因p53存在分子关联，目前正在研究其意义。将来，我们将通过启动子分析进行克隆来鉴定新的转录因子，并创建包括已知转录因子的蛋白质和蛋白质关联的核图谱，这对于阐明转录因子非常重要。我们目前正在引入酵母单杂交系统，并继续研究以确定新的转录因子。此外，为了分离抗癌药物诱导表达的基因，我们正在利用差异显示方法来鉴定新基因，其启动子的分析也在稳步进展。