抗癌剤の分子標的としての転写関連蛋白の発現機能解析と新治療法の開発

作为抗癌药物分子靶标的转录相关蛋白表达的功能分析和新治疗方法的开发

基本信息

批准号：
09255262
负责人：
河野公俊
金额：
$ 3.2万
依托单位：
University of Occupational and Environmental Health, Japan
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09255262/
关键词：
抗癌剤早期応答ストレスシグナル伝達 YB-1 DNA損傷転写因子

项目摘要

抗癌剤による癌細胞の示す早期応答ストレスのシグナル伝達と最終標的である転写因子に着目し、その発現や機能解析を基盤にして新しい癌治療法を考案することを目的として、今年度は我々の同定した分子標的として転写因子であるYB-1を中心に解析をすすめた。一方、抗癌剤、特にDNA損傷により誘導される遺伝子の同定とその制御領域の単離をすすめ、新しい分子標的のを転写因子を中心にすすめ、転写因子の制御からみた新しい治療法の考案を目指している。今年度の成果として、1.YB-1遺伝子のゲノム構造を明らかにし、特徴的な核酸結合領域であるCold Shock Domainのエキソン構造から、この遺伝子の進化的考察を行った。2.YB-1の蛋白の細胞内局在とGFPとのフュージョン蛋白の発現によりストレス応答による核内移行の機序の存在を明らかにした。またこの移行にはリン酸化が関与することが判明した。3.ストレス応答によるMDRIの発現上昇がYB-1の核内移行とカップルすることを、レポーターを導入した細胞株にアンチセンスを発現することより証明した。4.MDRIプロモーターの発現にはYB-1の結合のみならず給合部位近傍のメチル化の状態が関与することをMDR1遭伝子を持つ人工酵母染色体の導入株の解析で明らかにした。5.YB-1の結合部位を持つプロモーターとしてDNAトポイソメラーゼIIαに注目しDNAトポイソメラーゼIIの遺伝子のHeat Shockによる発言誘導にYB-1が結合しうるinvertedCCAATbox(Y-box)が関与することを示した。現在YB-1を中心とした細胞内の会合分子の同定をすすめている。一方MDR1プロモーターを用いたトポIを標的とする新しい治療法の開発は進行中である。

为了根据抗癌药物表达的早期反应应力的表达和功能分析来设计新的癌症治疗，抗癌药物表现出的早期反应应力，转录因子是最终靶标，并且使用其结果的表达和功能分析，我们今年一直在促进分析，重点是转录因子yb-1，这是我们的转录因子。另一方面，我们正在促进抗癌药物的鉴定，尤其是由DNA损伤引起的基因，并隔离其调节区域，并主要促进主要基于转录因子的新分子靶标，并旨在从转录因子的角度来设计新疗法。今年的结果，我们阐明了1.yb-1基因的基因组结构，并对特征性核酸结合区域的外显子结构（冷冲击结构域）进行了进化考虑。 2。YB-1蛋白的细胞内定位和与GFP的融合蛋白的表达揭示了应力反应中核易位的机理。还发现磷酸化参与了这种过渡。 3。我们证明，通过在已与报告基因引入的细胞系中表达反义，MDRI在应力反应中的表达增加以及YB-1的核易位。 4。对具有MDR1的人造酵母染色体的分析表明，MDRI启动子的表达不仅涉及YB-1的结合，而且还涉及喂养位点附近的甲基化状态。 5。专注于具有Yb-1结合位点的DNA拓扑异构酶IIα作为启动子，我们已经表明，可以结合Yb-1的InvertedCcaAtbox（Y-Box）参与热冲击的DNA拓扑异构酶II基因的诱导。目前，我们正在促进细胞内关联分子的鉴定，主要是YB-1。同时，正在进行使用MDR1启动子开发新的topoi靶向疗法。