リポゾームを用いた色素性乾皮症A群遺伝子治療の試み

使用脂质体进行着色性干皮病 A 组基因治疗的尝试

基本信息

批准号：
11140230
负责人：
錦織千佳子
金额：
$ 3.2万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

色素性乾皮症(XP)は紫外線によってDNAに生じた傷を修復する酵素を欠損するために、日光露光部に皮膚癌を生じる、高発癌性遺伝疾患で日本では除去修復能が低く、露光部の皮膚癌の発症も早く、神経症状を伴う相補性A群が最も多い。最近遺伝子導入のひとつの方法として効率の高い導入が可能とされているHVJリポゾームにXPA遺伝子を封入してXPAマウス細胞へ導入し、修復能の回復、細胞への傷害性の程度を分析し、XPA-HVJ-リポゾームの効果を評価した。ベクターはサイトメガロウイルスのエンハンサーとβ-actionのプロモーターをもつpCAGGSにヒトXPAcDNAを組み込んだpCAGGS-XPA並びにpcDNA3のEcoRIサイトにXPA遺伝子を組み込みHA tagをつけたpcHA- XPAを用いた。XPAマウスは大阪大学田中亀代次博士より供与を受けた。ベクターのHVJ-リポゾームへの封入には大阪大学金田安史博士の協力を得た。予め紫外線照射24、48時間後前にXPA-HVJ-リポゾームをXPAマウスの背部皮膚に皮内注射しておき、UVBを4kJ/m2同部に紫外線照射し、UDSを測定した。それと同じ照射4時間後の皮膚片でのピリミジンダイマー、(6-4)光産物の修復動態をそれぞれに特異的なモノクローナル抗体(金沢大学二階堂博士より供与)を用いて確認した。XPA-HVJリポゾームはコントロールリポゾームに比して明らかに紫外線照射後の不定期DNA合成能(UDS)の回復をさせ、ヒトXPA遺伝子がin vivoのマウス細胞で働くことが確認された。XPA-HVJリポゾーム処理群はコントロールリポゾームに比して、表皮、真皮ともにダイマー、(6-4)光産物の染色性が低かった。

由于高度致癌的遗传性疾病，在日本的颜料干燥的皮肤（XP）是一个低收入的，可在阳光暴露部分引起皮肤癌，以减少由紫外线引起的伤口的酶。快速，是最互补的一群具有神经症状的人。在最近的基因引入方法中，XPA基因被封闭在HVJ脂质体中，这可能引入高效率，并已将其引入XPA小鼠细胞，分析细胞的损伤程度和细胞的损伤程度。评估了XPA-HVJ-脂质体的影响。向量使用了PCAGGS-XPA，该PCAGGS-XPA将人类XPACDNA与位点巨型病毒增强子和β-Action启动子和pCNA3 ECORI位点结合在PCAGG中，并与XPA基因结合了XPA基因。 XPA鼠标由大阪大学的Kameju Tanaka博士提供。大阪大学的Yasushi Kaneda博士封闭了Vector的HVJ-Lipzome。事先，将XPA-HVJ-脂质体注射到XPA小鼠的背部XPA-HVJ-脂质体中，然后在XPA-HVJ脂质体提前24小时内注射，并将UVB辐射为4KJ/M2，并测量UDS。（6-4）使用皮肤碎片，（6-4），这是一种特定的单克隆抗体（Kanazawa University博士Nikaido博士）。与对照脂质体相比，XPA-HVJ脂质体在紫外线照射后清楚地恢复了不规则的DNA合成（UDS），并且已经证实，人XPA基因在体内小鼠细胞中起作用。与对照脂质体相比，（6-4），（6-4），（6-4），（6-4），（6-4），（6-4），（6-4）的XPA-HVJ脂质体较低，（6-4），（6-4）。