肝細胞増殖因子受容体(c-Met)を介するシグナル伝達の分子機構

肝细胞生长因子受体（c-Met）介导的信号转导分子机制

基本信息

批准号：
07273108
负责人：
喜多村直実
金额：
$ 75.52万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

肝細胞増殖因子(HGF)受容体(c-Met)遺伝子は種々のがんの発生に関わると考えられており、最近家族性腎がんの原因遺伝子として同定された。本研究ではc-Metを介する細胞内シグナル伝達機構について解析を行い以下の結果を得た。(1)HGFは正常肝細胞の増殖を促進するが、多くの肝がん由来細胞に対してはむしろ増殖を抑制する。そこでHGFに対してc-Metを介して増殖抑制応答を示す肝がん由来HepG2細胞を用いてシグナル伝達機構を解析した。HGF刺激したHepG2細胞ではMAPキナーゼの活性化が強く促進された。MAPキナーゼ・キナーゼ(MEK)に対する特異的阻害剤の効果を調べたところ、低いレベルのMAPキナーゼの活性化を示す低濃度の阻害剤処理により、HGF刺激に対する細胞増殖抑制応答が阻害され増殖が促進した。一方MAPキナーゼの活性化を完全に阻害する高濃度の阻害剤処理では増殖が抑制された。以上の結果より、HGF刺激による細胞増殖の制御にはMAPキナーゼ経路が重要な役割を果たしているが、この経路が強く活性化されると増殖が抑制されることが示唆された。(2)HrsはHGFで刺激された細胞においてc-Metを介して速やかにチロシンリン酸化される蛋白質である。またHrs結合蛋白質(Hbp)は、酵母two-hybrid法により単離された新しい蛋白質であり、構造内にSH3ドメインを持っている。このSH3ドメインに結合する蛋白質として脱ユビキチン化酵素UBPYが単離されている。そこでこのUBPYの機能を明らかにするために、HbpSH3ドメイン結合部位を欠損するUBPYを細胞に導入し解析した。その結果、結合部位を欠損するUBPYは増殖因子の細胞内分解を抑制することが明らかになった。したがってUBPYはHbpのSH3ドメインに結合し、増殖因子および受容体の分解経路に重要な役割を担っているものと考えられる。

肝细胞生长因子（HGF）受体（C-MET）基因被认为参与了各种癌症的发展，并且最近被确定为家族性肾脏癌的致病基因。在这项研究中，我们通过C-MET分析了细胞内信号传导的机制，并获得了以下结果。（1）HGF促进了正常肝细胞的增殖，而是抑制许多肝癌细胞的增殖。因此，使用源自肝癌的HEPG2细胞分析了信号转导机制，该肝癌通过C-MET表现出对HGF的增殖抑制反应。在HGF刺激的HEPG2细胞中，强烈促进了MAP激酶的激活。当我们研究特异性抑制剂对MAP激酶激酶（MEK）的影响时，低浓度的抑制剂的治疗表现出较低的MAP激酶激活水平，抑制了对HGF刺激的抑制细胞增殖反应并促进增殖。另一方面，完全抑制地图激酶激活的高浓度抑制剂的治疗抑制了生长。以上结果表明，尽管MAP激酶途径在通过HGF刺激控制细胞增殖方面起着重要作用，但是当该途径强烈激活时，抑制了增殖。（2）HRS是一种蛋白质，在用HGF刺激的细胞中通过C-MET迅速磷酸化的蛋白质。 HRS结合蛋白（HBP）是一种通过酵母两杂化方法分离的新蛋白，其结构内具有SH3结构域。去泛素酶Ubpy已被分离为与该SH3结构域结合的蛋白质。因此，为了阐明缺乏HBPSH3域结合位点的Ubpy的功能，被引入细胞中并进行了分析。结果，发现缺乏结合位点的Ubpy抑制了生长因子的细胞内降解。因此，Ubpy结合了HBP的SH3结构域，被认为在生长因子和受体降解的途径中起重要作用。