肝細胞増殖因子受容体(c-Met)を介するシグナル伝達の分子機構

肝细胞生长因子受体（c-Met）介导的信号转导分子机制

基本信息

批准号：
07273108
负责人：
喜多村直実
金额：
$ 75.52万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

肝細胞増殖因子(HGF)受容体(c-Met)遺伝子は種々のがんの発生に関わると考えられており、最近家族性腎がんの原因遺伝子として同定された。本研究ではc-Metを介する細胞内シグナル伝達機構について解析を行い以下の結果を得た。(1)HGFは正常肝細胞の増殖を促進するが、多くの肝がん由来細胞に対してはむしろ増殖を抑制する。そこでHGFに対してc-Metを介して増殖抑制応答を示す肝がん由来HepG2細胞を用いてシグナル伝達機構を解析した。HGF刺激したHepG2細胞ではMAPキナーゼの活性化が強く促進された。MAPキナーゼ・キナーゼ(MEK)に対する特異的阻害剤の効果を調べたところ、低いレベルのMAPキナーゼの活性化を示す低濃度の阻害剤処理により、HGF刺激に対する細胞増殖抑制応答が阻害され増殖が促進した。一方MAPキナーゼの活性化を完全に阻害する高濃度の阻害剤処理では増殖が抑制された。以上の結果より、HGF刺激による細胞増殖の制御にはMAPキナーゼ経路が重要な役割を果たしているが、この経路が強く活性化されると増殖が抑制されることが示唆された。(2)HrsはHGFで刺激された細胞においてc-Metを介して速やかにチロシンリン酸化される蛋白質である。またHrs結合蛋白質(Hbp)は、酵母two-hybrid法により単離された新しい蛋白質であり、構造内にSH3ドメインを持っている。このSH3ドメインに結合する蛋白質として脱ユビキチン化酵素UBPYが単離されている。そこでこのUBPYの機能を明らかにするために、HbpSH3ドメイン結合部位を欠損するUBPYを細胞に導入し解析した。その結果、結合部位を欠損するUBPYは増殖因子の細胞内分解を抑制することが明らかになった。したがってUBPYはHbpのSH3ドメインに結合し、増殖因子および受容体の分解経路に重要な役割を担っているものと考えられる。

肝细胞生长因子（HGF）受体（c-Met）基因被认为与多种癌症的发生有关，最近被确定为家族性肾癌的致病基因。在本研究中，我们分析了c-Met介导的细胞内信号转导机制，并获得了以下结果。 (1) HGF促进正常肝细胞的增殖，但实际上抑制许多肝癌来源的细胞的增殖。因此，我们使用肝癌来源的 HepG2 细胞分析了信号转导机制，该细胞通过 c-Met 对 HGF 表现出生长抑制反应。 HGF 刺激的 HepG2 细胞中 MAP 激酶激活得到强烈促进。我们研究了特定抑制剂对 MAP 激酶激酶 (MEK) 的影响，发现低浓度的抑制剂治疗（表明低水平的 MAP 激酶激活）可以抑制对 HGF 刺激的细胞抑制反应并促进增殖。另一方面，用完全抑制 MAP 激酶激活的高浓度抑制剂治疗可抑制增殖。这些结果表明MAP激酶途径在HGF刺激的细胞增殖的控制中发挥重要作用，并且当该途径被强烈激活时，增殖被抑制。 (2) Hrs 是一种在 HGF 刺激的细胞中通过 c-Met 快速酪氨酸磷酸化的蛋白质。 Hrs结合蛋白（Hbp）是通过酵母二杂交法分离得到的一种新蛋白，其结构中含有SH3结构域。去泛素化酶 UBPY 已被分离为与该 SH3 结构域结合的蛋白质。因此，为了阐明UBPY的功能，我们将缺乏HbpSH3结构域结合位点的UBPY引入细胞中并进行分析。结果表明，缺乏结合位点的UBPY可抑制生长因子的细胞内降解。因此，UBPY 与 Hbp 的 SH3 结构域结合，被认为在生长因子和受体的降解途径中发挥重要作用。