肝細胞増殖因子受容体(c-Met)を介するシグナル伝達の分子機構

肝细胞生长因子受体（c-Met）信号转导的分子机制

• 批准号: 12215043
• 负责人: 喜多村 直実
• 金额: $ 40.9万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12215043/
• 关键词: がん細胞の増殖; 肝細胸増殖因子(HGF); HGF受容体(c-Met); シグナル伝達; 細胞周期; cdkインヒビターp16; cdk2; siRNA; 肝細胞増殖因子(HGF); ERK経路; 肝細胞増殖因子受容体(c-Met); エンドサイトーシス; Hrs結合蛋白質(Hbp); 蛋白質のユビキチン化; MAPキナーゼ; Hrs; c-Met; がん細胞の増殖制御; 管腔形成

肝細胞増殖因子(HGF)受容体(c-Met)を介するがん細胞の増殖制御におけるシグナル伝達機構について、HGFによる肝がん細胞株HepG2の増殖抑制作用における細胞周期制御因子であるcdkインヒビターp16の役割を解析し、以下の結果を得た。1.p16のsiRNAにより細胞内のp16のHGFによる発現誘導を阻害した時の細胞周期について解析したところ、p16のsiRNAの発現によりHGFにより抑制されたBrdUのDNAへの取り込みが回復し、またHGFによりG1期で停止した細胞周期の回復が認められた。これらの結果は、HGFにより発現が誘導されたp16がHGFによる細胞周期のG1期での停止に必要であることを示している。2.HepG2細胞では、細胞周期を制御するキナーゼであるcdk2の活性低下が、HGFによる細胞周期の停止を誘導すると考えられている。HGFによるcdk2活性の低下とp16の発現誘導の関係を解析したところ、両者はよく相関していることが明らかになった。またHGFにより低下したcdk2活性は、p16のsiRNAの発現により回復した。これらの結果は、HGFによるp16の発現誘導が、細胞周期の停止を導くcdk2活性の低下に必要であることを示している。3.cdk2の活性はp21やp27などのcdkインヒビターにより阻害される。p16,p21,p27とcdk4,cdk2との結合について解析したところ、HGFによりp16とcdk4との結合が増加し、またp21あるいはp27とcdk4との結合が低下し、cdk2との結合が増加した。またp16のsiRNAの発現によりこれらの結合の変化は見られなくなった。これらの結果は、HGFによるp16の発現誘導がp21およびp27のcdk4からcdk2への移行に必要であり、その結果cdk2の活性の低下が導かれることを示している。

针对肝细胞生长因子（HGF）受体（c-Met）介导的控制癌细胞生长的信号转导机制，我们研究了细胞周期调节剂CDK抑制剂p16在HGF对肝脏生长抑制作用中的作用。我们分析了癌细胞系HepG2的作用，并获得了以下结果。 1.我们分析了当HGF对细胞内p16的表达诱导被p16 siRNA抑制时的细胞周期，发现p16 siRNA的表达恢复了被HGF抑制的BrdU掺入DNA的细胞周期。观察到G1期被阻滞。这些结果表明，p16 的表达是由 HGF 诱导的，是 HGF 诱导的细胞周期停滞在 G1 期所必需的。 2. 在 HepG2 细胞中，CDK2（一种调节细胞周期的激酶）活性降低，被认为可诱导 HGF 诱导细胞周期停滞。分析CDK2活性的降低与HGF诱导p16表达之间的关系表明，两者具有良好的相关性。此外，HGF降低的CDK2活性通过p16 siRNA的表达得以恢复。这些结果表明，HGF 诱导 p16 表达是导致细胞周期停滞的 CDK2 活性降低所必需的。 3.CDK2活性被p21和p27等CDK抑制剂抑制。对p16、p21和p27与CDK4和CDK2之间的结合的分析表明，HGF增加了p16和CDK4之间的结合，减少了p21或p27与CDK4之间的结合，并增加了与CDK2的结合。此外，p16 siRNA 表达后不再观察到这些结合变化。这些结果表明，p21和p27从CDK4转移到CDK2需要HGF诱导p16表达，这导致CDK2活性降低。

项目成果

Activation of c-Met (hepatocyte growth factor receptor) in human gastric cancer tissue

• DOI: 10.1111/j.1349-7006.2004.tb02185.x
• 发表时间: 2004-10-01
• 期刊: CANCER SCIENCE
• 影响因子: 5.7
• 作者: Inoue, T;Kataoka, H;Miyazawa, K
• 通讯作者: Miyazawa, K

R.Terauchi: "Requirement of regulated activation of Ras for response of MDCK cells to hepatocyte growth factor/scatter factor"Exp.Cell Res.. 256. 411-422 (2000)

R.Terauchi：“MDCK 细胞对肝细胞生长因子/分散因子反应的 Ras 调节激活的要求”Exp.Cell Res.. 256. 411-422 (2000)

K.Denda: "Functional characterization of Kunitz domains in hepatocyte growth factor activator inhibitor type 1"J. Biol. Chem.. (in press). (2002)

K.Denda：“肝细胞生长因子激活剂抑制剂 1 型 Kunitz 结构域的功能特征”J。

E.Mizuno: "Association with Hrs is required for the early endosomal localization, stability, and function of STAM"J.Biochem.. (in press). (2004)

E.Mizuno：“STAM 的早期内体定位、稳定性和功能需要与 Hrs 的关联”J.Biochem..（正在出版）。

Y.Uehara: "Rescue of embryonic lethality in hepatocyte growth factor/scatter factor knockout mice"Genesis. 27. 99-103 (2000)

Y.Uehara：“肝细胞生长因子/分散因子敲除小鼠胚胎致死性的拯救”创世纪。