Lewy小体病発症におけるα-シヌクレインの役割

α-突触核蛋白在路易体病发生中的作用

• 批准号: 10176206
• 负责人: 岩坪 威
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10176206/
• 关键词: Lewy小体; α-シヌクレイン; パーキンソン病

Lewy小体以外の異常蓄積物にα-synucleinが存在するかどうかを、多種類の変性疾患について検討し、多系統萎縮症(multiple system atrophy)の脳幹、小脳、基底核などの白質のオリゴデンドロサイトに出現するglial cytoplasmic inclusion(GCI)がα-synuclein陽性を示すことを見出した。presenilin 1,2,βAPPなどに変異を有するFAD脳においてα-synuclein陽性のLB及び関連病変の出現を検討した。約60%の症例で扁桃核及び近隣の側頭葉皮質にα-synuclein陽性のLB及びLewy neuriteの出現を認めた。家族性ADの原因遺伝子変異は、LBにおけるα-synuclein蓄積も促進する可能性があることを指摘した。各種培養細胞に野生型及びA53T変異α-synuclein cDNAを一過性もしくは恒常的に発現し、α-synucleinの局在、代謝、細胞形態・生存への影響を検討した。COS細胞の一過性発現系では、α-synucleinは細胞質及び一部核に局在した。Neuro2a,HEK293恒常発現細胞では主として細胞質に出現し、核も陽性を示した。ウェスタンブロットでは、大部分のα-synucleinは可溶性画分に回収され、18 kDaの1本のバンドを示した。これらの性質は変異の有無、C末端FLAG tagの有無により影響を受けなかった。2種類のα-synuclein特異モノクローナル抗体を用いたsandwich ELISAの樹立を試み、1〜5 ng/ml以上の濃度域でα-synucleinを定量可能な系を確立した。

我们研究了除路易人以外的异常积累中是否存在α-突触核蛋白，并发现胶质细胞质包容（GCI）（GCI）（GCI）出现在白质中的少突胶质细胞中，例如脑干，小脑，小脑和基础神经节，多种系统的神经节，多个系统的神经化，对α---核酸素是阳性的。在Prad脑的1、2，βAPP等突变中研究了α-突触核蛋白阳性LB和相关病变的出现。大约60％的病例显示出α-突触核蛋白阳性LB和Lewy神经蛋白的出现。值得注意的是，家族性AD中的致病基因突变也可能促进LB中的α-突触核蛋白的积累。野生型和A53T突变体α-突触核蛋白cDNA在各种培养的细胞中瞬时或组成型表达，并研究了α-突触核蛋白对定位，代谢，细胞形态和生存的影响。在COS细胞的瞬时表达系统中，α-突触核蛋白位于细胞质和部分核中。 Neuro2a，HEK293表达细胞的HEK293主要出现在细胞质中，细胞核也呈阳性。在蛋白质印迹中，大多数α-突触核蛋白在可溶性部分中回收，显示了一个18 kDa的单个带。这些特性不受突变或不存在或不存在C端标志标签的影响。我们尝试使用两种类型的α-突触核蛋白特异性单克隆抗体建立三明治ELISA，并建立了一个能够在1至5 ng/mL或更高浓度范围内量化α-核蛋白的系统。

项目成果

Iwatsubo T.et al.: "Neurodegenerative Dementias:Amyloid deposits and plague formation" McGraw-Hill ( in press), (1999)

Iwatsubo T.et al.：“神经退行性痴呆：淀粉样蛋白沉积和鼠疫形成”McGraw-Hill（印刷中），（1999）

Naruse S et al: "Effects of PS1 deficiency on membrane protein trafficking in neurons?" Neuron. 17. 181-190 (1998)

Naruse S 等人：“PS1 缺陷对神经元膜蛋白运输的影响？”

Tomita.T et al: "β APP γ-secretase and SREBP site 2 protease are two different enzymes." Neuroreport. 5. 911-913 (1998)

Tomita.T 等人：“β APP γ-分泌酶和 SREBP 位点 2 蛋白酶是两种不同的酶。”Neuroreport。

Tokuhiro S et al: "The presenilin 1 mutation (M146V) linked to familial Alzheimer's disease attenuates the neuronal differentiation of N Tera 2 cells" Biochemical and Biophysical Research Communications. 244. 751-755 (1998)

Tokuhiro S 等人：“与家族性阿尔茨海默病相关的早老素 1 突变 (M146V) 会减弱 N Tera 2 细胞的神经元分化”《生物化学和生物物理研究通讯》。

Baba M et al: "Aggregation of α-synuclein in Lewy bodies of sporadic Parkinson's disease and dementia with Lewy bodies." American Journal of Pathology. 152. 879-884 (1998)

Baba M 等人：“散发性帕金森病和路易体痴呆中 α-突触核蛋白的聚集。美国病理学杂志”152。879-884（1998）。