CD3合成酵素遺伝子により誘導される細胞増殖シグナルの機構解析

CD3合酶基因诱导细胞增殖信号的机制分析

• 批准号: 10152223
• 负责人: 古川 鋼一
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10152223/
• 关键词: ガングリオシド; 糖脂質; 糖転移酵素; メラノーマ; GD3; PC12

ヒトのメラノーマやT細胞白血病に特異的に発現するGD3の細胞増殖における意義につき、GD3合成酵素遺伝子を種々の細胞に導入して、その表現型の変化を検討することにより解析した。まずラット褐色細胞腫PC12に、GD3合成酵素遺伝子を導入したトランスフェクタントでは、1.著しい増殖速度の亢進、2.神経成長因子(NGF)による分化誘導に対する不応、3.無血清処置によるアポトーシスへの抵抗性の獲得などが主な変化として観察された。著しい増殖能をもたらしたメカニズムの検討のため、NGF受容体TrkAのリン酸化、その下流のMAPキナーゼの活性化状態につき検討したところ、GD3合成酵素遺伝子導入細胞では、NGF刺激の有無に関わらず、TrkAのリン酸とMAPキナーゼの活性化を認めた。種々のキナーゼインヒビターを用いた増殖抑制実験の結果から、このトランスフェクタントで見られる増殖の亢進がTrkA/Ras/MAPキナーゼ系を介していることが示唆された。また、TrkAの二量体形成もNGF刺激に無関係に見られた。よって遺伝子導入によりTrkAの構造的変異が惹起され、恒常的な活性化状態を招いたと思われる。また、無血清培地によるアポトーシス誘導に対して、このトランスフェクタントは抵抗性を示したが、PI3キナーゼインヒビターのワルトマニン存在下ではアポトーシス抵抗性が消失した。よって、このトランスフェクタントでは糖鎖変化によってPI3キナーゼ活性が上昇していることが示唆された。これらの結果は、メラノーマやT細胞白血病の腫瘍増殖の機構の一部を反映するものと思われ、現在メラノサイトに対する遺伝子導入、糖脂質改変を行って、その細胞変化の検討を行っている。

GD3合成酶基因被引入各种细胞，因为GD3的细胞增殖的重要性，GD3的显着性，该细胞增殖在人类黑色素瘤和T细胞白血病中通常表达，并通过检查表达类型的变化来分析。首先，在大鼠棕色的Celloma PC12，1。提出GD3合成酶基因的转染物中，提高繁殖速度，2。主要变化是对凋亡的抵抗力。为了检查引起显着繁殖能力的机制，发现了NGF受体TRKA的磷酸化和下游MAP激酶的活化状态。使用各种动力学蛋白司醇的增殖抑制实验的结果表明，转染剂中看到的增长的增强是通过TRKA/RAS/MAP激酶系统。 TRKA的双体形成也独立于NGF刺激。因此，看来TRKA的结构突变是由引入基因引起的，导致恒定激活状态。此外，转移剂表现出对血清的抗凋亡引导的抗性，但在PI3 Kinazin Herminin的存在中失去了抗凋亡的耐药性。因此，有人提出，由于糖链的变化，转染剂增加了PI3激酶活性。这些结果被认为反映了黑色素瘤和T细胞白血病中肿瘤增殖机制的一部分，目前正在向黑素细胞进行基因，修饰糖脂质并检查其细胞变化。

项目成果

Iwanaga Masako: "Paroxysmal nocturnal haemoglobinuria clones in patients with myelodysplastic syndromes." Br.J.Haematol.102. 465-474 (1998)

Iwanaga Masako：“骨髓增生异常综合征患者的阵发性睡眠性血红蛋白尿克隆。”

Fukuda Minoru: "Enhancement of in vitro and in vivo anti-tumor activity of anti-GD2 monoclonal antibody 220-51 against human neuroblastoma by granulocyte-macrophage colony-stimulating factor and granulocyte colony-stimulating factor." Int.J.Mol.Med.2. 471

Fukuda Minoru：“通过粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和粒细胞集落刺激因子增强抗 GD2 单克隆抗体 220-51 抗人神经母细胞瘤的体外和体内抗肿瘤活性。”

Borgeld Harm-Jan Warner: "Appropriately spaced nuclear localizing signals are necessary for efficient nuclear import of non-nuclear proteins." Biochem.Biophys.Res.Commun.(in press).

Borgeld Harm-Jan Warner：“适当间隔的核定位信号对于非核蛋白的有效核输入是必要的。”