エンドセリン-1によるアポートシスの制御

内皮素-1 控制细胞凋亡

基本信息

批准号：
08671140
负责人：
七里眞義
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08671140/
关键词：
エンドセリン血管内皮細胞アドレノメデュリン ET_A受容体 ET_B受容体

项目摘要

血管内皮細胞を無血清培養培地に交換したのち、時間経過とともに出現する浮遊死細胞を集めてDNAを抽出し、terminal transferaseにより^<32>P標識dideoxyATPを用いて3′-end labelingを行い、DNA fragmentationを検出、さらに、血清除去後、subnuclear bodyやクロマチンの濃縮像など、アポートシスに特徴的な所見の出現を形態学的に検討した。さらに、血管内皮細胞から産生されるエンドセリン-1やアドレノメデュリンなどの血管作動性因子が、c-Myc依存性アポートシスを制御するかどうかを調べた。エンドセリン-1・アドレノメデュリンは血清除去後アポートシスを濃度依存性に抑制した。エンドセリン-1の作用は内皮に発現しているET_B受容体を介して作用していた。また、血管内皮は大量のエンドセリン-1を産生・分泌していた。血管内皮には単一で高親和性のアドレノメデュリン受容体の存在を認めた。また、内皮にはAMmRNA(1.6kb)が発現し、培養上清中にAM様免疫活性を認めた。これらのことから、エンドセリン・アドレノメデュリンがオートクリン/パラクリン因子として、アポートシスの制御に関与しているのではないかとの仮設のもとに、培養上清中に抗ラットエンドセリン抗体・および抗ラットアドレノメデュリン抗体を添加し産生されたエンドセリン・アドレノメデュリンを中和したところ、アポートシスは著明に増加した。内皮はアドレノメデュリンにより濃度依存性にcAMP産生を増加させた。しかし、アドレノメデュリンのアポートシス抑制効果はcAMP阻害薬(Rp-cAMP)により影響を受けなかった。Forskolin(10^<-5>M)、Prostaglandin I_2(10^<-6>M)はcAMP産生を促進したにもかかわらず、アポートシス抑制作用は示さなかった。アドレノメデュリンのアポートシス抑制作用はそのcAMP産生促進作用と一致しないことから、cAMP以外の情報伝達経路が関与している可能性が考えられた。

在用无晶状体培养的血管内皮细胞代替血管内皮细胞后，收集出现的浮动死细胞，提取DNA，使用末端转移酶^<32> p-sign dineoxyAtp进行3'-End标记。除去血液纯化，正式检查了凋亡的独特外观，例如亚核体和染色质。此外，由血管内皮细胞产生的血管活性因子（例如内素-1和依Henomedulin）控制着是否控制了C-YC依赖性公寓。末端CERIN-1，肾上腺素，在去除血清后抑制蛋白酶依赖于浓度。端肩1的作用通过内皮中表达的ET_B受体作用。血管内皮产生并分泌了大量内粒子1。血管内皮已被公认为是单个高精确的adrene Medulin受体。在内皮中表达弹药（1.6kb），并且在培养上清液中观察到类似AM的免疫活性。基于这些事实，在临时结构下，抗rAT-内塞抗体/和抗ratadrene抗体抗体可能与中和par腺因子的凋亡相关。生产的麦杜蛋白已显着增加。内皮增加了cAMP的产量，依赖于腺麦德体蛋白依赖于浓度。然而，抑制adren甲素的抑制作用不受cAMP抑制剂（RP-cAMP）的影响。尽管促进了营地产量，但Forskolin（10^<-5> m）和前列腺素I_2（10^<-6> m）并未显示出凋亡的抑制作用。 Adrena Medulin的任命抑制作用与其营地生产促进效应不符，因此可能涉及CAMP以外的信息传输路线。