血管特異的コンディショナルターゲティングによるRAMP2の病態生理学的意義の解明

通过血管特异性条件靶向阐明 RAMP2 的病理生理学意义

• 批准号: 10J07696
• 负责人: 小山 晃英
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10J07696/
• 关键词: アドレノメデュリン; RAMP2; 血管内皮細胞; 血管新生; 血管恒常性; 遺伝子欠損マウス; 臓器保護; 細胞骨格; 血管の恒常性; リンパ管新生; RAMP; 血管

アドレノメデュリン(AM)は多くの組織に分布し、血管拡張作用に加え、抗炎症作用、臓器保護作用など、多彩な生理活性を有するペプチドである。AMノックアウトマウス(AM-/-)は、血管の構造異常により胎生致死となる。更に、AMの受容体活性調節タンパクであるRAMP2のノックアウトマウス(RAMP2-/-)はAM-/-同様、血管の発達不全、構造異常により胎生致死となる事から、RAMP2によって、AMの血管新生作用が規定されていることを、我々はこれまで報告してきた。本研究では、血管のAM-RAMP2系の病態生理学的意義を解明するために、血管内皮細胞特異的RAMP2コンディショナルノックアウトマウス(E-RAMP2-/-)ラインを樹立し、解析を行なった。E-RAMP2-/-のほとんどは出生前後に致死であり、成体での解析に限界があった。このため本年度の研究では、成体になってからRAMP2欠損誘導を可能とする、薬剤誘導性血管内皮細胞特異的RAMP2コンディショナルノックアウトマウス(DI-E-RAMP2-/-)ラインを樹立し、解析を行った。DI-E-RAMP2-/-では、RAMP2欠損誘導後早期から、血管透過性亢進に伴う全身性浮腫の発症が認められた。このときの血管内皮細胞は、細胞骨格を担うアクチンが重合不全を起こしており、cortical actin ringの形態異常が認められた。アクチン重合を制御するRhoファミリーの活性を検討したところ、DI-E-RAMP2-/-の血管内皮細胞では、Rac1の活性が低下しており、RhoAの活性が亢進していた。一方、血管内皮細胞にAMを添加すると、cortical actin ringは増強し、その作用はRac1阻害剤により抑制された。以上の結果から、AM-RAMP2系が血管内皮細胞の細胞骨格形成を制御しており、血管の恒常性維持に必須であることが明らかとなった。

肾上腺素蛋白（AM）分布在许多组织中，是一种具有多种生理活性的肽，包括血管舒张特性，以及抗炎特性和器官保护特性。 AM敲除小鼠（AM - / - ）由于血管的结构异常而致命。此外，我们报道了RAMP2基因敲除小鼠（RAMP2 - / - ），一种调节AM受体活性的蛋白质，由于血管发育衰竭和结构异常而导致致命，因此RAMP2调节AM的血管生成作用。在这项研究中，我们建立了一个血管内皮细胞特异性的RAMP2条件敲除小鼠（E-RAMP2 - / - ）线，以阐明血管中AM-RAMP2系统的病理生理意义并进行了分析。大多数e-ramp2 - / - 出生前后都是致命的，成人分析存在局限性。因此，在今年的研究中，建立并分析了药物诱导的内皮细胞特异性RAMP2条件敲除小鼠（DI-E-RAMP2 - / - ）线。 DI-E-RAMP2 - / - 表明，在RAMP2缺乏诱导后早期观察到与血管通透性增加相关的全身性水肿。目前，负责细胞骨架的肌动蛋白正在血管内皮细胞中发生聚合失效，并且发现皮质肌动蛋白环具有异常的形态。当我们研究调节肌动蛋白聚合的RHO家族的活性时，RAC1活性在DI-E-RAMP2 - / - 的血管内皮细胞中降低，而RhoA活性增加。另一方面，当将AM添加到血管内皮细胞中时，皮质肌动蛋白环得到了增强，并且Rac1抑制剂抑制了其作用。以上结果表明，AM-RAMP2系统调节血管内皮细胞的细胞骨架结构的形成，对于维持血管稳态至关重要。

项目成果

血管内皮細胞におけるアドレノメデュリン-RAMP2システムの役割

肾上腺髓质素-RAMP2系统在血管内皮细胞中的作用

• 发表时间: 2010
• 作者: 小山晃英;桜井敬之;神吉昭子;荒居琢磨;新藤優佳;吉沢隆浩;Yang Lei;植竹龍一;沖村綾乃;山内啓弘;田中愛;新藤隆行
• 通讯作者: 新藤隆行

アドレノメデュリン-RAMP2システムによる血管新生・血管保護作用

肾上腺髓质素-RAMP2系统的血管生成及血管保护作用

• 发表时间: 2010
• 作者: 久野純治;石渡弘治;永田夏海;Teruhide Koyama;Teruhide Koyama;小山晃英;小山晃英;Teruhide Koyama;小山晃英
• 通讯作者: 小山晃英

The role of adrenomedullin-RAMP2 system in vascular endothelial cells.

肾上腺髓质素-RAMP2系统在血管内皮细胞中的作用。

• 发表时间: 2010
• 作者: 久野純治;石渡弘治;永田夏海;Teruhide Koyama;Teruhide Koyama;小山晃英;小山晃英;Teruhide Koyama
• 通讯作者: Teruhide Koyama

Regulation of vascular homeostasis by adrenomedullin-RAMP2 system in development and senescence.

发育和衰老过程中肾上腺髓质素-RAMP2 系统对血管稳态的调节。

• 发表时间: 2010
• 作者: 久野純治;石渡弘治;永田夏海;Teruhide Koyama;Teruhide Koyama;小山晃英;小山晃英;Teruhide Koyama;小山晃英;Teruhide Koyama
• 通讯作者: Teruhide Koyama

AM-RAMP2 System, as a Novel Regulator of Angiogenesis, Vascular Integrity, and Homeostasis.

AM-RAMP2 系统，作为血管生成、血管完整性和稳态的新型调节器。

• 发表时间: 2010
• 作者: 久野純治;石渡弘治;永田夏海;Teruhide Koyama;Teruhide Koyama;小山晃英;小山晃英;Teruhide Koyama;小山晃英;Teruhide Koyama;小山晃英;Teruhide Koyama
• 通讯作者: Teruhide Koyama