がん細胞に特有な細胞接着構造の分子構築の解明

阐明癌细胞特有的细胞粘附结构的分子结构

基本信息

批准号：
05152072
负责人：
祖父江憲治
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.ラウス肉腫ウイルスによる形質転換細胞の基質接着構造ラウス肉腫ウイルスによる形質転換細胞には運動性に富む動的接着部と静的な辺縁接着部の2種類の基質接着構造が形成されることを見い出した。動的接着部にはアクチンの他、ミオシン・カルデスモン・トロポミオシンなどの収縮系蛋白質及びゲルゾリンが集積しており、これらの蛋白質がこの接着構造の活発な運動性の物質的基盤となっていることを示した。一方、辺縁接着部にはインテグリンの著明な集積があり、悪性細胞の組織への浸潤の際は辺縁接着部によってまず組織に接着し、その後蛋白質分解酵素を分泌し活発に運動する動的接着部によって組織への浸潤が行われると考えられた。更に、このような細胞接着構造の機能分担は、骨吸収をつかさどる破骨細胞でも見られることを示した。2.カルデスモンの遺伝子構造平滑筋及び非筋肉細胞のアクトミオシン系調節蛋白質であるカルデスモンの遺伝子構造を解析し、平滑筋細胞の分化にともなうカルデスモンアイソフォームの発現変換機構の解明を目指した。まず、カルデスモンの一時構造を決定し、アクトミオシン相互作用のCa制御に関与する最小機能領域を同定した。ヒトカルデスモン遺伝子の染色体上の位置を決定し、高分子量型と低分子量型カルデスモンの発現変換が一つのエクソンに存在する2箇所のスプライスサイトの選択によることを明らかにした。さらに、カルデスモン遺伝子には2つの独立したプロモーターが存在することを示し、組織特異的な発現に必要なシスエレメントを同定した。

1.劳斯肉瘤病毒转化细胞的底物粘附结构我发现劳斯肉瘤病毒转化的细胞中形成两种类型的底物粘附结构：高活动性动态粘附位点和静态边缘粘附位点。除了肌动蛋白之外，诸如肌球蛋白、钙结合蛋白、原肌球蛋白和凝溶胶蛋白等收缩蛋白也在动态粘附区域中积累，并且已经表明这些蛋白质是该粘附结构的主动运动的物理基础。另一方面，边缘粘连处有大量的整合素积累，当恶性细胞浸润到组织中时，它们首先通过边缘粘连粘附在组织上，然后分泌蛋白水解酶并主动移动到组织中。通过目标粘附位点进行渗透。此外，我们发现，在负责骨吸收的破骨细胞中也观察到了细胞粘附结构的这种功能分裂。 2. caldesmon的遗传结构我们分析了caldesmon的遗传结构，caldesmon是平滑肌和非肌肉细胞中的肌动球蛋白调节蛋白，旨在阐明caldesmon亚型在平滑肌细胞分化过程中的表达转化机制。首先，我们确定了钙结合蛋白的临时结构，并确定了参与肌动球蛋白相互作用的 Ca2+ 调节的最小功能区域。我们确定了人类caldesmon基因的染色体位置，并揭示了caldesmon高分子量和低分子量形式之间表达的转换是由于一个外显子中两个剪接位点的选择所致。此外，我们发现 caldesmon 基因具有两个独立的启动子，并鉴定了组织特异性表达所需的顺式元件。