癌遺伝子による遺伝子の発現・複製制御の研究ーヒトパピロ-マウイルスを中心としてー

癌基因的基因表达和复制控制研究 - 关注人乳头瘤病毒 -

基本信息

批准号：
02151027
负责人：
伊藤嘉明
金额：
$ 11.2万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02151027/
关键词：
ヒトパピロ-マウイルス E6遺伝子 E7遺伝子がん抑制遺伝子 p53 Rbタンパク cーFos cーJun

项目摘要

ヒトパピロ-マウイルス(HPV)の発がん遺伝子産物、E6,E7タンパクにがん抑制遺伝子産物p53及びRbタンパクの結合する事が確認された。E7タンパクには非リン酸化型が特異的に結合するが13番目のロイシンをセリンに変えるとこの特異性がなくなった。E6タンパクがp53に結合すると急速にp53の分解が起こると報告されているが、ラット3Y1細胞を用いた場合、E6の有無に拘わらずp53の量には殆ど変化なかった。これが何を意味するか検討中である。皮膚型のHPVで強発がん能を持つもの(5,8,47型)のE6タンパクは3Y1細胞を形態的にトランスフォ-ムしたが、弱発がん性のもの(14,20,21,25型)ではその活性が弱かった。興味深いことに、性器型HPV(16型等)のE7タンパクには強いトランスフォ-ム能があるのに、同じく発がん性でありながら皮膚型HPVのE7には全くその活性が見られなかった。EGFはHPV16のE6/E7mRNAの発現を転写レベルで抑制する事が観察され、それに必要な領域がウイルスDNAの制御領域内に同定された。アデノウイルスE1Aによる転写活性化はATF部位に結合するCREーBP1を介して起こる事が判明した。アデノウイルスDNAの複製起点を含む断片に潜在的プロモ-タ-活性のある事が判明した。オクタマ-結合タンパクがSV40,BK,JC,HSVのDNA複製起点のATに富む配列に結合する事が見出され、複製制御の研究に新しい道が開かれた。高度にリン酸化したcーFosはcーJunとの結合能が低下しており、cーFosのtransーrepressionとの関係が推測された。Rbタンパクに結合する195kDと70kDのタンパクが検出された。maf遺伝子産物が二量体を作る事が実験的に示された。組織特異的遺伝子発現に関与していると思われる転写因子PEBP3のα,β,両鎖のcDNAクロ-ニングが進んでいる。全体としてがん化と制御因子の関係の認識が深まった。

已证实抑癌基因产物p53和Rb蛋白与人乳头瘤病毒（HPV）致癌基因产物E6和E7蛋白结合。未磷酸化形式特异性结合 E7 蛋白，但将第 13 个亮氨酸改为丝氨酸消除了这种特异性。据报道，当E6蛋白与p53结合时，p53迅速降解，但当使用大鼠3Y1细胞时，无论E6存在或不存在，p53的量几乎没有变化。我们目前正在考虑这意味着什么。强致癌性皮肤型HPV（5、8、47型）E6蛋白对3Y1细胞进行形态转化，但强致癌性皮肤型HPV（14、20、21、25型）E6蛋白发生形态转化3Y1细胞)活性较弱。有趣的是，虽然生殖器HPV（16型等）的E7蛋白具有很强的转化能力，但同样具有致癌性的皮肤HPV的E7却完全没有这种活性。观察到 EGF 在转录水平上抑制 HPV16 E6/E7 mRNA 的表达，并且在病毒 DNA 的调控区域内确定了所需的区域。研究发现，腺病毒 E1A 的转录激活是通过 CRE-BP1 与 ATF 位点的结合而发生的。发现含有腺病毒DNA复制起点的片段具有潜在的启动子活性。人们发现八聚体结合蛋白能够与 SV40、BK、JC 和 HSV 的 DNA 复制起点中富含 AT 的序列结合，为复制控制研究开辟了新途径。高度磷酸化的 c-Fos 与 c-Jun 的结合能力降低，表明与 c-Fos 的反式抑制有关。检测到与Rb蛋白结合的195kD和70kD的蛋白。实验表明maf基因产物形成二聚体。 PEBP3 的 α 链和 β 链的 cDNA 克隆正在进行中，PEBP3 是一种被认为参与组织特异性基因表达的转录因子。总体而言，对癌变与调节因素之间关系的认识已经加深。