転写・複製制御因子の解析を中心にしたHPVによる発がん機構の研究

HPV引起的致癌机制研究，重点分析转录和复制控制因子

基本信息

批准号：
03258214
负责人：
伊藤嘉明
金额：
$ 8.96万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

APー1をはじめとする転写因子の複製における関与をウイルスDNA複製系で解析してきた。今回、哺乳動物細胞DNA複製のoriとしては最も解析の進んでいるDHFRori内のAPー1結合部位を含むDNA断片が、ポリオ-マウイルスDNA複製系でエンハンサ-として機能することが判明し、DHFRoriの解析の一側面になり得ることが示唆された。cーRel,vーRelのポリオ-マウイルスDNA複製系を用いた解析は、予想通り、この系の有用性を明白に示した。重要な結果の第1は、従来vーRelに特別の生化学的機能があるかどうか(転写の抑制因子としての機能以外の)不明であったのに対し、明白に、vーRelには強い複製活性化能のあることを示した点である。そうなると、vーRelのトランスフォ-ム能はこの複製活性化能に基づくのか、それとも従来議論されている様に、転写の抑制能(転写活性化能を持たないための受動的機能?)に基づくものなのか、検討する必要が出てきた。詳細な変異導入実験で答えが得られると思われるので今後この方向を目ざしたい。cーRelはvーRelの持つトランスフォ-ム能を潜在的にはすべて持つはずなのにトランスフォ-ムできないのは、カルボキシ末端(vーRelで欠損している)にその能力を抑える機能があるからであると当然考えられる。この問題をGAL4のDNA結合ドメインにcーRelのカルボキシ末端を融合させたキメラたんぱくを作り解析しはじめたが結論を得るまでには継続して研究を進める必要がある。

我们使用病毒 DNA 复制系统分析了转录因子（包括 AP-1）在复制中的参与情况。这次，我们发现DHFRori（哺乳动物细胞DNA复制的ori）中含有AP-1结合位点的DNA片段在多瘤病毒DNA复制系统中起到增强子的作用。可能是分析的一方面。正如预期的那样，使用 c-Rel、v-Rel 多瘤病毒 DNA 复制系统进行的分析清楚地证明了该系统的实用性。第一个重要结果是，虽然之前还不清楚v-Rel是否具有任何特殊的生化功能（除了作为转录抑制子的功能），但很明显v-Rel具有很强的激活复制的能力。如果是这样的话，v-Rel的转化能力是基于这种激活复制的能力，还是因为它抑制转录的能力（被动功能，因为它不具有转录激活能力？），就像之前所说的那样有必要考虑它是否基于。我想我们可以通过详细的突变引入实验找到答案，所以我未来想朝这个方向努力。虽然c-Rel应该潜在地具有v-Rel所具有的所有转化能力，但它不能转化的原因是羧基末端（v-Rel中缺失）具有抑制该能力的功能，这是很自然的。认为这是因为有。我们已经开始通过创建嵌合蛋白来分析这个问题，其中 c-Rel 的羧基末端与 GAL4 的 DNA 结合结构域融合，但在得出结论之前我们需要继续我们的研究。