転写・複製制御因子の解析を中心にしたHPVによる発がん機構の研究

HPV引起的致癌机制研究，重点分析转录和复制控制因子

• 批准号: 03258214
• 负责人: 伊藤 嘉明
• 金额: $ 8.96万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03258214/
• 关键词: 転写因子; DNA複製; ポリオ-マウイルス; AP1; Rel; DHFR(ジヒドロ葉酸還元酵素); トランスフォ-メ-ション; ヱンハンサ-; 転写因子; DNA複製; ポリオ-マウイルス; AP1; Rel; DHFR(ジヒドロ葉酸還元酵素); トランスフォ-メ-ション; ヱンハンサ-

APー1をはじめとする転写因子の複製における関与をウイルスDNA複製系で解析してきた。今回、哺乳動物細胞DNA複製のoriとしては最も解析の進んでいるDHFRori内のAPー1結合部位を含むDNA断片が、ポリオ-マウイルスDNA複製系でエンハンサ-として機能することが判明し、DHFRoriの解析の一側面になり得ることが示唆された。cーRel,vーRelのポリオ-マウイルスDNA複製系を用いた解析は、予想通り、この系の有用性を明白に示した。重要な結果の第1は、従来vーRelに特別の生化学的機能があるかどうか(転写の抑制因子としての機能以外の)不明であったのに対し、明白に、vーRelには強い複製活性化能のあることを示した点である。そうなると、vーRelのトランスフォ-ム能はこの複製活性化能に基づくのか、それとも従来議論されている様に、転写の抑制能(転写活性化能を持たないための受動的機能?)に基づくものなのか、検討する必要が出てきた。詳細な変異導入実験で答えが得られると思われるので今後この方向を目ざしたい。cーRelはvーRelの持つトランスフォ-ム能を潜在的にはすべて持つはずなのにトランスフォ-ムできないのは、カルボキシ末端(vーRelで欠損している)にその能力を抑える機能があるからであると当然考えられる。この問題をGAL4のDNA結合ドメインにcーRelのカルボキシ末端を融合させたキメラたんぱくを作り解析しはじめたが結論を得るまでには継続して研究を進める必要がある。

已经使用病毒DNA复制系统分析了转录因子（包括AP-1）的转录因子的参与。这次，发现DNA片段含有DHFRORI中包含AP-1结合位点的DNA片段，这是哺乳动物细胞DNA复制的最先进的ORI，是脊髓灰质炎病毒DNA复制系统中增强子的功能，这表明它们可以是DHFRORI分析的一个方面。使用脊髓灰质炎病毒DNA复制系统对C-REL的V-REL分析清楚地证明了该系统的实用性。第一个重要的结果是，虽然以前尚不清楚V-Rel是否具有特殊的生化功能（作为转录阻遏物功能除外），但很明显，V-Rel具有强大的复制激活能力。在这种情况下，有必要研究V-REL的转换能力是否基于这种复制激活的能力，或者，正如过去所讨论的那样，它基于抑制转录的能力（无源功能没有转录激活能力？）。我们希望详细的诱变实验能够提供答案，因此我们将来会为此提供目标。自然认为，C-Rel无法转换的原因，而V-REL的所有转换功能可能是因为它具有抑制其在Carboxy Terminus（不足V-Rel）的能力的功能。然后通过创建将C-Rel的羧基末端与GAL4的DNA结合域融合的嵌合蛋白来开发和分析这个问题，但是在我们得出结论之前，研究必须继续进行。