マウス白血病細病に於ける胸腺白血病(TL)抗原発現の分子機構の解析

小鼠白血病疾病中胸腺白血病（TL）抗原表达的分子机制分析

基本信息

批准号：
61015111
负责人：
小幡裕一
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Aichi Cancer Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

腫瘍特異抗原並びに分化抗原の発現機構を解析するために、マウス胸腺白血病(TL)抗原をモデルとして、分子生物学的・細胞工学的・胚工学的手法を用いて、実験を行ない、次の様な結果を得た。1.細胞の白血病化に伴なうTL抗原の発現機序の解析:正常では発現されないTL抗原が白血病細胞で発現されるのは、遺伝子の転写のレベルにおける活性化によることを、各種正常並びに白血病細胞におけるTLmRNAの検索により明らかとした。さらに、遺伝子及び染色体の構造の解析を行ない、(1)トランスポゾン様配列の挿入,点突然変異等によるTL遺伝子,もしくは5'側プロモーター領域での構造の変異,(2)遺伝子の増幅,転座,もしくは再構成,(3)クロマチン構造の変化,等が白血病細胞に於ける遺伝子活性化の原因ではないことを明らかにし、細胞質因子が関与していることを示唆した。2.細胞分化に伴なうTL抗原の発現機序の解析:白血病化に伴なうTL抗原の発現の場合と同様の結果が得られた。しかし分化に伴なう発現には、クロマチン構造(DNase【I】に対する感受性)が関与することを明らかとした。3.トランスフェクション法によるIn vitroにおけるTL遺伝子の発現の解析:クラスIであるが発現様式の全く異なるH-2遺伝子と各種TL遺伝子との間で作成した各種キメラ遺伝子をマウスL細胞に導入し、それら遺伝子の発現を検索した。その結果、H-2遺伝子の5'側プロモーターは、TL遺伝子のそれに比べ10倍以上強いことを明らかとし、またTL遺伝子の転写がL細胞では一定の塩基配列から開始していないことを示す結果を得た。4.トランスジェニックマウス作成によるIn vivoにおけるTL遺伝子の発現の解析:TL並びにキメラ遺伝子の導入に成功してはいるが、抗原発現を示すトランスジェニックマウスを得るには至っていない。

为了分析肿瘤特异性抗原和分化抗原的表达机制，使用分子生物学，细胞工程和胚胎工程方法，使用小鼠胸腺白血病（TL）抗原作为模型进行了实验，并获得了以下结果。 1。分析与细胞白血病相关的TL抗原的表达机制：通过在各种正常和白血病细胞中寻找TL mRNA的揭示，通常在基因转录水平上激活在白血病细胞中表达了通常表达的TL抗原。此外，分析了基因和染色体的结构，并揭示（1）插入tl基因的转座子样序列，TL基因的突变或由于点突变引起的5'启动子区域中的结构（2）扩增，（2）扩增，易位或重建基因的结构，（3涉及细胞质因素。 2。分析与细胞分化相关的TL抗原的表达机理：获得了与与白血病相关的TL抗原相同的结果。然而，据揭示了染色质结构（对DNase [i]的敏感性）与表达伴随分化有关。 3。通过转染方法在体外对TL基因表达进行分析：在H-2基因之间产生的各种嵌合基因，这些基因是I类，但具有完全不同的表达模式，并且将各种TL基因引入了小鼠L细胞中，并搜索了这些基因的表达。结果，据揭示了H-2基因的5'启动子比TL基因强的10倍以上，并且TL基因的转录不是从L细胞中的一定基本序列开始。 4。通过创建转基因小鼠对TL基因表达的分析：尽管已成功引入了TL和嵌合基因，但尚未获得表现出抗原表达的转基因小鼠。