非典型的MHCクラスI抗原の機能

非典型 MHC I 类抗原的功能

基本信息

批准号：
05272229
负责人：
小幡裕一
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Aichi Cancer Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ヒト及びマウスには、典型的MHCクラスI抗原(HLA-A,H-2K等)に加えて、非典型的MHCクラスI抗原が多数存在する。本研究の目的は、マウスTL抗原に結合する抗原ペプチドならびに認識するTCRの解析を中心に、非典型的MHCクラスI抗原の機能を分子、細胞並びに個体レベルで解明することである。今年度は、以下の成果が得られた。1.MHCクラスI分子としてのTL抗原:H-2K^b遺伝子のプロモターとTL(T3^b)遺伝子を結合したキメラ遺伝子を導入したマウス(宿主:C3H)は、TL抗原を皮膚を含めた種々の組織に発現する。このマウスの皮膚をC3Hへ移植すると、短期間で拒絶され、TL抗原に対するCTLが誘導される。CTLは、H-2分子による抗原提示を必要せず、TCRがTL抗原を直接認識すること、またTL抗原が典型的MHCクラスI分子と同様に抗原提示できることが示唆された。2.胸腺に発現するTL抗原の役割:上記と同様に遺伝子導入マウスの皮膚を、胸腺にTL(Tla^a-3)を発現するマウスに移植した。皮膚に発現するTLと胸腺に発現するTLの間では、31個のアミノ酸の差異があり、移植片は拒絶された。誘導されたCTLもH-2非拘束性であり、TCRがTLを直接認識するが、樹立したCTLクローンの25%は、TCRgammadeltaであった。一方、胸腺にTL抗原を発現しないC3Hマウスから樹立した上記のCTLクローンは、100%がTCRalphabetaであった。したがって、胸腺でのTL抗原の発現が、gammadeltaT細胞の選択に関与していることが示唆された。3.非典型的MHCクラスI抗原の遺伝的多型:7種のTL遺伝子の多型の解析により、抗原ペプチドと結合してTCRに提示する領域(PBR)の配列は1ケ所を除いて同一であり、多型はPBR以外の所に存在することが明らかになった。この結果は、特定のペプチドを特定のTCRへ提示することが、TL抗原の機能であることを示唆するものであった。さらに、塩基配列とアミノ酸の置換パターンの理論進化学的解析結果からも、この仮説は支持された。

在人和小鼠中，除了典型的MHC I类抗原（HLA-A、H-2K等）外，还存在许多非典型的MHC I类抗原。本研究的目的是从分子、细胞和个体水平阐明非典型MHC I类抗原的功能，重点分析与小鼠TL抗原结合的抗原肽以及识别它们的TCR。今年，取得了以下成果。 1. TL抗原作为MHC I类分子：引入嵌合基因的小鼠（宿主：C3H），该嵌合基因结合了H-2K^b基因的启动子和TL（T3^b）基因，传递TL抗原，包括表达于各种组织中。当将该小鼠的皮肤移植到C3H时，它会在短时间内被排斥，并诱导出针对TL抗原的CTL。有人提出，CTL不需要H-2分子的抗原呈递，TCR直接识别TL抗原，并且TL抗原可以与典型的MHC I类分子类似地呈递。 2.胸腺中表达的TL抗原的作用：按照与上述相同的方式，将转基因小鼠的皮肤移植到胸腺中表达TL(Tla^a-3)的小鼠中。皮肤表达的TL和胸腺表达的TL之间存在31个氨基酸差异，移植物被排斥。尽管诱导的 CTL 也是 H-2 非限制性的且 TCR 直接识别 TL，但所建立的 CTL 克隆中有 25% 是 TCRgammadelta。另一方面，从胸腺中不表达TL抗原的C3H小鼠建立的上述CTL克隆100%是TCRalphabeta。因此，有人认为胸腺中TL抗原的表达参与了γδT细胞的选择。 3.非典型MHC I类抗原的遗传多态性：对7种TL基因多态性的分析表明，与抗原肽结合并将其呈递给TCR的区域(PBR)的序列除了一个位置之外是相同的。多态性存在于 PBR 以外的位置。这一结果表明TL抗原的功能是将特定的肽呈递给特定的TCR。此外，这一假设得到了碱基序列和氨基酸取代模式的理论进化分析结果的支持。