TL抗原遺伝子とT細胞分化異常、白血病発生

TL抗原基因、异常T细胞分化和白血病发展

• 批准号: 06282269
• 负责人: 小幡 裕一
• 金额: $ 6.4万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06282269/
• 关键词: マウスTL遺伝子; 遺伝子導入マウス; T細胞分化; 白血病; Notch-1遺伝子; ヒトTL様遺伝子; 腸上皮細胞; 胸腺細胞; マウスTL抗原遺伝子; γδT細胞; c-myc遺伝子; マウスTL遺伝子; 遺伝子導入マウス; T細胞分化; 白血病; Notch-1遺伝子; ヒトTL様遺伝子; 腸上皮細胞; 胸腺細胞; マウスTL抗原遺伝子; γδT細胞; c-myc遺伝子

マウスTL抗原は、主要組織適合抗原クラス1分子ではあるが、正常での発現は胸腺細胞および腸上皮細胞に限られ、また特定のマウス系では白血病の癌関連抗原として発現される。TL抗原の機能を明らかにする目的で、TL遺伝子導入マウスの作出と解析を行ってきた。遺伝子導入マウスの1系統は、大量のTL抗原を胸腺に発現し、T細胞の分化異常を起こし、さらに高頻度でγδT細胞型白血病を発症する。本研究では遺伝子導入マウスの解析を中心に、TL分子の機能、白血病の発祥機序ならびに正常T細胞の分化機構を解明することを試み、以下の結果を得た。(1)本系のみならず、他のTL遺伝子導入マウス系統でもT細胞の分化がγδ経路へ偏向していることを明らかとし、導入TL遺伝子の発現が白血病発生の最初のステップであるT細胞分化異常の原因であることを示す確証を得た。(2)白血病の発症には、c-myc、bcl-2およびpim-1の発現増大と内在性レトロウイルスの新たな染色体への挿入の複数の遺伝子の変異が関与することが示された。これらの異常に加えて、細胞の分化を決定すると報告されているNotch-1遺伝子の発現異常も白血病の発症に関与することを示唆する結果を得た。すなわち、Notch-1の正常サイズの転写産物の発現が増大するとともに、Notch-1遺伝子内へのマウスIAPレトロポゾンの挿入によりNotch-1の異常転写産物が産生されることを観察した。(3)ヒトTL様遺伝子の同定を目的として、マウスTL遺伝子に特異的な配列に基づき作成したDNAプライマーを用い、ヒト大腸上皮細胞のRNAを材料にRT-PCRを行った。小腸と大腸の上皮細胞および胸腺に特異的に発現する新規の遺伝子に由来するPCR産物が検出された。全長cDNAを単離するため、PCR産物をプローブとして大腸上皮細胞cDNAライブラリーの検索を行っている。

尽管鼠TL抗原是一类主要的组织相容性抗原，但它们的正常表达仅限于胸腺细胞和肠上皮细胞，在某些小鼠系统中，它们以癌症相关的白血病表示。为了阐明TL抗原的功能，我们一直在创建和分析TL转基因小鼠。一条转基因小鼠在胸腺中表达大量的TL抗原，导致异常T细胞分化，并且更频繁地发展γδT细胞类型白血病。这项研究的重点是对转基因小鼠的分析，并试图阐明TL分子的功能，白血病的起源和正常T细胞的分化机制，并获得以下结果。 （1）揭示了T细胞分化不仅在该系统中而且在其他TL转基因小鼠菌株中偏向于γδ途径，并证实了转基因TL基因的表达是T细胞分化异常的原因，这是白血病发育的第一步。 （2）已经表明，白血病的发作涉及在插入内源性逆转录病毒新染色体中的多个基因中C-MYC，BCL-2和PIM-1的表达增加。除这些异常外，结果表明，据报道确定细胞分化的Notch-1基因的异常表达也参与白血病的发展。换句话说，观察到Notch-1正常大小的转录本的表达增加，并且将小鼠IAP逆转录子插入Notch-1基因中产生了Notch-1的异常转录本。 （3）为了鉴定人类TL样基因，使用基于针对小鼠TL基因的序列创建的DNA引物，使用来自人类结肠上皮细胞的RNA作为材料进行RT-PCR。检测到在上皮细胞中特异性表达的新型基因和大肠的胸腺的PCR产物。为了隔离全长cDNA，使用PCR产物作为探针在结肠上皮细胞cDNA文库中进行搜索。