Polι遺伝子導入トランスジェニックマウスにおけるウレタン誘発肺発がんの解析:損傷乗り越え型DNA合成酵素遺伝子Polιは肺発がん耐性遺伝子Par2と同一か?

Polι转基因小鼠乌拉坦诱发肺癌的分析：损伤存活DNA合酶基因Polι与肺癌抗癌基因Par2相同吗？

基本信息

批准号：
15023260
负责人：
李康弘
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Okinaka Memorial Institute for Medical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15023260/
关键词：
肺発がんマウス耐性遺伝子トランスジェニックウレタン Polι

项目摘要

我々はBALB/cマウスのウレタン誘発肺発癌耐性遺伝子であるPar2のポジショナルクローニングを目指している。昨年度までに、Par2を含む第18染色体の約20cMの領域をC57BL/6からBALB/cに移入したBALB.B6-Par2 congenic系統を樹立し、Par2の第18染色体上の位置を約0.5cMの領域に絞った。さらに、BALB.B6-Par2とBALB/cとの間でキメラマウスを作製し、Par2形質の責任因子は腫瘍化標的細胞自身に存在することを明らかにするとともに、Par2形質の責任因子は二段階発癌説におけるイニシエーションへの感受性を修飾することを示した。Par2形質に関するこれらの情報に従って、セレラ社のmouse genome databaseを検索したところ、約0.5cMのPar2領域に極めてfidelityの低い損傷乗り越え型DNA polymeraseであるPolιの遺伝子が存在することを発見した。様々なマウス純系のPolι cDNAの塩基配列を決定すると、BALB/c Polι cDNAのcDNAはsingle nucleotide polymorphismやアミノ酸配列の観点から、非常に特異であることが明らかになった。よって、現在我々は、BALB/cのPolιが他系統のそれに比べ活性が低いか、或いは、質的にfidelityが高いなどの原因により、ウレタンによるイニシエーションの際に癌関連遺伝子の変異頻度を下げ、腫瘍発生を減じているのではないかと推測している。今年度は、C57BL/6系統由来Polι cDNAをtransgeneとしてBALB/cマウスに導入し、肺特異的に発現させるべく、transgenic mouseの作製を試みた。現在までに3匹のfoundersが得られたが、今後これらを繁殖させ、ウレタン誘発肺発癌実験を行なう予定である。我々の仮説が正しければ、このtransgenic mouseはウレタン誘発肺発癌に対しBALB/cよりも高い感受性を示す筈である。予想通りの結果が得られた場合、Polιは極めて有力なPar2候補遺伝子であると結論される。

我们旨在将尿烷诱导的肺癌发生抗性基因的PAR2定位，BALB/C小鼠。到去年，建立了BALB.B6-PAR2先天谱系，其中从C57BL/6进口了大约20厘米的18染色体染色体，其中包括PAR2，并将PAR2在18号染色体上的位置缩小到大约0.5厘米的面积。此外，在BALB.B6-PAR2和BALB/C之间产生了嵌合小鼠，表明PAR2性状的负责因子本身存在于肿瘤性靶细胞本身中，而PAR2性状的负责因素修饰了在两阶段致癌理论中对起始的敏感性。遵循有关PAR2特征的信息，我们搜索了Cerela的小鼠基因组数据库，发现大约0.5厘米的PAR2区域具有POLι的基因，POLL是一种非常可预性的DNA聚合酶，具有极低的保真度。确定各种纯小鼠cDNA的碱基序列的测定表明，在单核苷酸多态性和氨基酸序列方面，BALB/CPOLιCDNA的cDNA非常具体。因此，我们目前猜测BALB/C的POLι比其他菌株的活跃不如其他菌株，或者它具有质量高的保真度，从而降低了使用尿道氨酸的肿瘤发生率。今年，我们从C57BL/6菌株作为转基因引入了polιcDNA到BALB/C小鼠中，并试图创建转基因小鼠以允许肺特异性表达。迄今为止，已经获得了三名创始人，将来将重现它们并进行氨基甲酸酯诱导的肺癌发生实验。如果我们的假设是正确的，则该转基因小鼠应比BALB/C对氨基甲酸酯诱导的肺癌发生更高的敏感性。如果预测结果，则可以得出结论，Polι是极有效的PAR2候选基因。