新規マウス担癌irAEモデルを用いた免疫チェックポイント阻害薬耐性機序の解明

使用新型小鼠荷瘤 irAE 模型阐明免疫检查点抑制剂耐药机制

• 批准号: 22K15617
• 负责人: 三重 慧一郎
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Foundation for Biomedical Research and Innovation at Kobe
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15617/
• 关键词: 免疫チェックポイント阻害薬; 免疫関連有害事象; PD-1; CD8陽性T細胞

抗PD-1抗体をはじめとする免疫チェックポイント阻害薬（ICIs）は顕著な抗腫瘍効果を示す一方で、同一腫瘍種においても治療効果が得られる症例と得られない症例がいることが問題となっている。本研究の目的は、申請者が独自に開発した担癌皮膚免疫関連有害事象(irAE)モデルマウスを用いて、ICIsの治療効果が得られるかどうかを左右する鍵となる腫瘍によるT細胞抑制機序を明らかにすることである。令和4年度は、まず試験に供するマウス数を増やして独自の担癌皮膚irAEモデルマウスにおける抗PD-L1抗体と皮膚irAEの程度の関連を検証した。その結果、両者が良好な負の相関を示すことが確認され、本モデルマウスが実臨床で認められるirAEの発症とICIsの治療効果が相関する現象を再現するものであることが示唆された。続いて、腫瘍の有無が皮膚irAEに及ぼす影響を検証し、担癌マウスでは皮膚irAEの程度が有意に軽減するとともに、浅耳下腺リンパ節のCD8陽性エフェクターT細胞が有意に減少することを明らかにした。これらの結果から、腫瘍はCD8陽性T細胞におけるT細胞受容体（TCR）シグナル伝達を阻害し、その程度の差異がICIsの治療効果やirAE発症の個体差を引き起こすのではないかと考えられた。この仮説を検証するため、マウスに腫瘍を接種後、皮膚irAEを誘導する前の段階で腫瘍領域リンパ節を採取してリンパ節細胞をin vitroにて固相化抗CD3抗体を用いて刺激し、フローサイトメーターでリン酸化ZAP70の発現を解析した。その結果、予想に反して腫瘍の増大とリン酸化ZAP70の発現に正の相関が認められ、腫瘍はTCRシグナル伝達のより下流を阻害している可能性が推測された。

免疫检查点抑制剂（ICIs），包括抗PD-1抗体，显示出显着的抗肿瘤作用，但问题是，相同肿瘤类型的某些病例可能对治疗有反应，而另一些则可能没有。本研究的目的是使用申请人最初开发的荷瘤皮肤免疫相关不良事件（irAE）模型小鼠来研究肿瘤诱导的T细胞抑制机制，这是确定ICIs是否具有治疗效果的关键。目的是为了澄清顺序。 2020财年，我们首先增加了测试的小鼠数量，并在我们独特的荷癌皮肤irAE模型小鼠中验证了抗PD-L1抗体与皮肤irAE程度之间的关系。结果证实两者表现出良好的负相关性，表明该模型小鼠再现了实际临床实践中观察到的irAE的发病与ICIs的治疗效果相关的现象。接下来，我们验证了肿瘤存在与否对皮肤irAEs的影响，发现在荷瘤小鼠中，皮肤irAEs程度显着降低，腮腺浅淋巴结中CD8阳性效应T细胞明显减少。减少。这些结果表明肿瘤抑制CD8阳性T细胞中的T细胞受体（TCR）信号传导，抑制程度的差异可能导致ICIs治疗效果和irAE发生的个体差异。为了检验这一假设，在给小鼠接种肿瘤后和诱导皮肤irAE之前，收获肿瘤区域的淋巴结并用固定化抗CD3抗体在体外刺激淋巴结细胞。使用流式细胞仪分析磷酸化ZAP70的表达。 。结果，与预期相反，肿瘤生长与磷酸化 ZAP70 的表达之间观察到正相关，表明肿瘤可能抑制下游 TCR 信号传导。