クロマチン構造修飾などによる遺伝子状態・細胞機能のエピゲノム性調節とその維持

通过染色质结构修饰等对基因状态和细胞功能进行表观基因组调控和维持。

基本信息

批准号：
15011223
负责人：
清水章
金额：
$ 3.14万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15011223/
关键词：
抗体遺伝子クラススイッチ転写制御アクセシビリティー E2A Id2 アレルギー ChIP

项目摘要

Id2遺伝子の破壊マウスにおいて、血清中のIgE量が著増することを見いだした。本研究ではこの現象の主な分子基盤として、Bリンパ球におけるε鎖へのクラススイッチ組換えが著明に亢進していることなどがあり、この組換えが転写因子E2Aによって活性化されるε鎖非組換え型転写に依存していること、正常Bリンパ球ではTGF-β1の信号を受けてId2の発現が誘導され、これがE2Aの作用を阻害することによってε鎖非組換え型転写を抑制する結果、ε鎖へのクラススイッチ組換えが特異的にきわめて低く抑えられていることなどが原因となっていることを明らかにした。Id2遺伝子の破壊マウスにおいてBリンパ球におけるε鎖へのクラススイッチ組換えが著明に亢進していること、正常Bリンパ球ではTGF-β1の信号を受けたId2の発現によってε鎖へのクラススイッチ組換えが特異的にきわめて低く抑えられる現象を利用し、試験官内で特定遺伝子領域クロマチン(この場合抗体ε鎖)の状態変化をきわめて短期間に効率良く誘導・解析できる実験系が確立された。これにより、クラススイッチ組換えに対する標的遺伝子のアクセシビリティがその領域のヒストンのアセチル化ときわめて良く相関していることが確認されたが、Id2によって転写を抑制するとヒストンの脱アセチル化を阻害しても組換えの抑制は解除できなかった。この結果から、ヒストン脱アセチル化はアクセシビリティの結果であり、転写そのものの調節がアクセシビリティを決定していると判明した。さらに、この組換えの必須因子である、AIDの組換え標的領域クロマチンへの結合の有無を、クロマチン免疫沈降(ChIP)法を応用して検出したところ、転写に伴って、結合が検出された。この結果から、転写複合体による組換え因子の呼び寄せがアクセシビリティ制御の実態であることが強く示唆された。

我发现ID2基因破坏小鼠的血清中IgE量增加。在这项研究中，这种现象的主要分子基础是，B淋巴细胞中的类转换重组到ε链中已显着增强，并且这种重组被转移因子E2A激活。 - 分组转录，正常的B淋巴细胞是由TGF-β1的信号诱导的，ID2的表达被诱导，这抑制了E2A对ε链对非重组转录的影响。专门降低了对ε链的类开关重组。 B淋巴细胞中小鼠到ε链中的ID2破坏小鼠显着增强，在正常的B淋巴细胞中，由于ID2的表达，在TGF-β1的信号下，与ε链相类似。低点，可以在短时间内建立了一种实验系统，可以有效地指导和分析特定基因区域染色质（在这种情况下为抗体ε链）。结果，已经证实，当组蛋白在该区域的乙酰化乙酰化时，对于类开关重组的目标基因的可访问性也非常相关，但是即使抑制了ID2，即使抑制了转录，也是Histon的。被抑制。从这个结果可以发现，历史化删除是可访问性的结果，并且调整转移本身已确定可访问性。此外，当重组基本因素的存在或不存在与AID的赎回区域的结合时，可以通过应用染色质免疫沉积法来检测与转录的键。从这个结果中，强烈建议转录复合物重组因子的呼吁是可及性控制的实际情况。