転写制御因子の多機能性-翻訳調節へのクロストーク

转录调控因子的多功能性——翻译调控的串扰

基本信息

批准号：
17659080
负责人：
清水章
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659080/
关键词：
抗体遺伝子クラススイッチ転写制御 Id2 NFκB ヒストンアセチル化 Pax5 Bcl6

项目摘要

本研究では、Bリンパ球の最終分化段階、すなわち形質細胞が多量の抗体を産生するにあたって起こる翻訳制御の変更が、抑制性転写制御因子であるId2遺伝子の破壊によって、この分化のマスターとされる遺伝子転写には一見無関係に増強されることが見出され、これは翻訳制御が細胞分化の中にプログラムされた過程として起こるものであることを意味すると考えられることから、Id2遺伝子破壊マウスのBリンパ球をモデル実験系として、転写制御因子が未知の機能として翻訳制御、ことに翻訳開始信号の選択制御に関与している可能性を検証した。Id2遺伝子破壊マウスのId2遺伝子破壊マウスのBリンパ球をLPSとIL-4によって刺激で培養し、最終分化マーカーであるシンデカンの発現をモニターしつつ、各種翻訳因子のリン酸化などの修飾状態や分解速度などを正常Bリンパ球と比較した。このときにId2遺伝子を導入して強制的に発現させることで検出された相違点を修復できるか検討した。これらの結果は、転写の制御(抑制)因子と考えられていた、Id2が何らか細胞質内の信号伝達系を制御修飾していることを強く示唆したが、翻訳制御との明確なクロストークに関する確証を得るには至っていない。一方、CpG配列を含むオリゴヌクレオチドが、IgG1とIgEへのクラススイッチ組換えを、非組換え型転写の制御を介して特異的に抑制することを見出し、その分子機構を関与が想定できる転写制御因子の遺伝子破壊マウス由来Bリンパ球を用いて解析した。その結果、この抑制にはそれぞれE2A、STAT6を抑制するId2、Bcl6は関与しておらず、NFkBとIRF4の活性抑制を介していることが見出された。

在这项研究中，B 淋巴细胞最终分化阶段（浆细胞产生大量抗体）发生的翻译控制变化被认为是通过破坏 Id2 基因（一种抑制性转录调节因子）来控制这种分化的。研究发现，基因转录似乎是独立增强的，这是由于翻译调控所致。因此，我们使用来自Id2基因破坏的小鼠的B淋巴细胞作为模型实验系统来研究翻译控制和功能未知的转录控制因子的控制，特别是，我们验证了其参与翻译起始的选择控制的可能性。信号。通过LPS和IL-4刺激培养Id2基因破坏小鼠的B淋巴细胞，监测终末分化标记物多聚糖的表达，并监测各种翻译因子的磷酸化及其降解等修饰状态。将速度等特性与正常B淋巴细胞进行比较。此时，我们研究是否可以通过引入Id2基因并强制其表达来修复检测到的差异。这些结果强烈表明，被认为是转录调节（抑制）因子的Id2以某种方式调节和修饰细胞质信号转导系统，但与翻译调节之间没有明显的串扰，我还没有得到任何证实。然而。另一方面，我们发现含有CpG序列的寡核苷酸通过控制非重组转录特异性抑制IgG1和IgE的类别转换重组，并且我们假设所涉及的分子机制是转录控制。该分析是使用衍生的B淋巴细胞进行的。来自具有该因子基因破坏的小鼠。结果发现，这种抑制并不涉及分别抑制E2A和STAT6的Id2和Bcl6，而是通过抑制NFkB和IRF4活性来介导。