蛋白質チロシンリン酸化と癌細胞の増殖応答

蛋白质酪氨酸磷酸化与癌细胞增殖反应

• 批准号: 14028021
• 负责人: 山梨 裕司
• 金额: $ 20.93万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14028021/
• 关键词: 癌; シグナル伝達; 造血細胞; チロシンキナーゼ; Ras-Erk; アダプター分子; EBウイルス; 蛋白質

チロシンキナーゼ(PTK)は癌細胞の増殖制御に深く関与する機能分子である。代表者らはその制御機構を解明する目的で、独自に単離したDok-1(p62^<dok>)とそのファミリー分子の造血器腫瘍における機能と作用機序の解析を進めている。昨年度の本研究の結果から、我々はDok-1とDok-2がサイトカインによる増殖及び生存シグナルを負に調節することで、白血病の抑制に機能していることを提唱してきた。そこで、本年度は、Dok-1/2による癌抑制機能の場を特定する為、骨髄細胞の移植実験を行った。その結果、Dok-1/2二重欠損マウスの骨髄細胞を移植した場合にのみ白血病の発症が確認され、また、その二重欠損マウスの骨髄細胞は増殖因子無添加条件下でのin vitroコロニー形成能を持つ事も確認された。この結果は、Dok-1/2の癌抑制機能が血球内での機能にあることを示すものである(J. EXP. Med.,2004)。他方、Dokファミリー分子による癌抑制の分子機構に関しては、エフェクター分子の結合領域と予想されるチロシン残基の重要性をDok-1について網羅的に検討した。その結果、従前から重要とされていたrasGAPとの会合部位(Tyr-295、Tyr-361)に加えてTyr-336とTyr-340の重要性が明らかになった。興味深いことに、両チロシン残基をファニルアラニンに置換したDok-1変異体はrasGAPとの会合能を維持しつつも、Rasの抑制能を喪失していた。これは、Dok-1にrasGAP以外のエフェクター分子を示唆する重要な知見と言える(Genes Cells,2004)。この他にも、発癌やその防御との関わりが深い免疫シグナルに対するDok-1/2の抑制機能の発見や、線虫のRas-Erkシグナル系を正に制御する新規アダプター分子の同定など、癌細胞の増殖応答に係るシグナル系の解析が進められた。

酪氨酸激酶（PTK）是一种与控制癌细胞增殖密切相关的功能分子。为了阐明其调控机制，代表们目前正在分析独立分离的Dok-1（p62^<dok>）及其家族分子在造血肿瘤中的功能和作用机制。基于去年这项研究的结果，我们提出Dok-1和Dok-2通过负向调节细胞因子诱导的增殖和生存信号来抑制白血病。因此，今年我们进行了骨髓细胞移植实验，以确定Dok-1/2的抑癌功能位点。结果，只有当移植Dok-1/2双缺陷小鼠的骨髓细胞时，才证实白血病的发展，并且发现这些双缺陷小鼠的骨髓细胞在无生长因子的情况下在体外定植也证实了它具有形成的能力。该结果表明Dok-1/2的肿瘤抑制功能在于其在血细胞内的功能(J. EXP. Med.，2004)。另一方面，关于Dok家族分子抑制癌症的分子机制，我们全面研究了Dok-1中酪氨酸残基的重要性，预计这些残基是效应分子的结合区域。结果，除了先前重要的rasGAP关联位点（Tyr-295、Tyr-361）之外，Tyr-336和Tyr-340的重要性也被揭示。有趣的是，两个酪氨酸残基都被苯丙氨酸取代的 Dok-1 突变体失去了抑制 Ras 的能力，同时保持了与 rasGAP 结合的能力。这是一项重要发现，表明 Dok-1 存在除 rasGAP 之外的效应分子（Genes Cells，2004）。此外，我们还发现了Dok-1/2对与癌发生及其防御密切相关的免疫信号的抑制功能，并鉴定了在线虫中正向调节Ras-Erk信号系统的新接头分子。与细胞增殖反应相关的信号系统取得了进展。

项目成果

Ken-Ichi Imadome: "CD40 ligand is a critical effector of Epstein-Barr virus in host cell survival and transformation."Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 100. 7836-7840 (2003)

Ken-Ichi Imadome：“CD40 配体是 Epstein-Barr 病毒在宿主细胞存活和转化中的关键效应物。”Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 100. 7836-7840 (2003)

Identification of BMP and activin membrane-bound inhibitor (BAMBI), an inhibitor of transforming growth factor-β signaling, as a target of the β-catenin pathway in colorectal tumor cells

• DOI: 10.1074/jbc.m310876200
• 发表时间: 2004-02-20
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Sekiya, T;Adachi, S;Akiyama, T
• 通讯作者: Akiyama, T

Role of Dok-1 and Dok-2 in myeloid homeostasis and suppression of leukemia.

• DOI: 10.1084/jem.20041247
• 发表时间: 2004-12-20
• 期刊: The Journal of experimental medicine
• 作者: Yasuda T;Shirakata M;Iwama A;Ishii A;Ebihara Y;Osawa M;Honda K;Shinohara H;Sudo K;Tsuji K;Nakauchi H;Iwakura Y;Hirai H;Oda H;Yamamoto T;Yamanashi Y
• 通讯作者: Yamanashi Y

Masakazu Terauchi: "Placental extravillous cytotrophoblasts persistently express class I MHC molecules after human cytomegalovirus infection."J.Virology. 77. 8187-8195 (2003)

Masakazu Terauchi：“在人巨细胞病毒感染后，胎盘绒毛外细胞滋养层持续表达 I 类 MHC 分子。”J.Virology。

Dok-1 and Dok-2 are negative regulators of lipopolysaccharide-induced signaling.

• DOI: 10.1084/jem.20041817
• 发表时间: 2005-02-07
• 期刊: The Journal of experimental medicine
• 作者: Shinohara H;Inoue A;Toyama-Sorimachi N;Nagai Y;Yasuda T;Suzuki H;Horai R;Iwakura Y;Yamamoto T;Karasuyama H;Miyake K;Yamanashi Y
• 通讯作者: Yamanashi Y