真核細胞RecQ関連遺伝子群によるゲノムの安定維持機構

真核RecQ相关基因的稳定基因组维护机制

基本信息

批准号：
14014202
负责人：
関政幸
金额：
$ 2.94万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14014202/
关键词：
RecQ WRN BLM ノックアウト DT40 ゲノム安定維持機構

项目摘要

本研究では、出芽酵母のRECQ遺伝子SGS1と遺伝学的に関連がある遺伝子を網羅的に集め、sgs1破壊株の表現型と対比させながら解析した。その中で特にMMS4遺伝子については、Mms4はRAD52組換え修復経路で働くが、Sgs1とは異なり、DNA傷害時の相同染色体間での組換えの上昇に関与しないことを明らかにした。また組換え中間体"HJ"を切断できる大腸菌RusAタンパク質をmms4変異株に発現させると。mms4株の薬剤感受性が相補されることを見いだした(Odagiri et al.,DNA repair,2003)。さらにMms4と複合体を形成するMus81のの欠損株mus81ではDNA傷害時に上昇する姉妹染色分体間の組換えが起こらないことをはじめて見いだし(未発表)、Mms4/Mus81の機能を知る上で、Keyとなる発見をしたと評価できる。一方、脊椎動物細胞に存在する5つのRecQタンパク質(RECQL1,BLM,WRN,RTS,RECQL5)のうち、今まで機能未知のRECQL1,RECQL5がBLMの機能をバックアップすることをはじめて見いだした(Wang et al., Mol.Cell.Biol., in press)。さらに酵母でSgs1といっしょに機能するTop3に関して、ニワトリDT40 TOP3α単独株,TOP3α-BLM二重変異株を作製し解析した。その結果、BLM欠損株で観察される高頻度の"姉妹染色分体間の交換(SCE)"がDT40 TOP3α単独株でも見いだされ、SCEの抑制においてTop3αがBLMのco-factorとして働くことを明らかにした(投稿準備中)。DT40 TOP3α欠損株ではG2の初期にその細胞周期を停止し、細胞核は巨大化し、ヘテロクロマチン領域が弛緩しているデーターが得られ、Top3αがクロマチン高次構造の構築に働くことをはじめて示唆した(未発表)。

在本研究中，我们全面收集了与酿酒酵母RECQ基因SGS1相关的基因，并通过与sgs1破坏菌株的表型进行比较进行分析。特别是MMS4基因，我们发现Mms4在RAD52重组修复途径中起作用，但与Sgs1不同，它不参与DNA损伤时同源染色体之间重组的增加。此外，当可切割重组中间体“HJ”的大肠杆菌RusA蛋白在mms4突变株中表达时。我们发现mms4菌株的药物敏感性是互补的（Odagiri等人，DNA修复，2003）。此外，我们首次发现，DNA损伤时姐妹染色单体之间的重组不会发生在与Mms4形成复合物的Mus81菌株中，这种情况不会发生（未发表）。关键发现。另一方面，在脊椎动物细胞中存在的5种RecQ蛋白（RECQL1、BLM、WRN、RTS和RECQL5）中，首次发现迄今为止功能未知的RECQL1和RECQL5支持该功能BLM（Wang 等人，Mol.Cell.Biol.，出版中）。此外，对于在酵母中与Sgs1一起发挥作用的Top3，构建并分析了鸡DT40 TOP3α单株和TOP3α-BLM双突变株。结果，在 DT40 TOP3α 单独菌株中也发现了 BLM 缺陷菌株中观察到的高频率“姐妹染色单体交换（SCE）”，这表明 Top3α 在抑制 SCE 中充当了 BLM 的辅助因子（准备）。发布）。在DT40 TOP3α缺陷株中，细胞周期在G2早期停滞，细胞核变大，异染色质区域松弛，首次提示Top3α在构建高阶染色质结构中发挥作用（（未发表）。