真核細胞RecQ関連遺伝子群によるゲノム構造の維持機構

真核RecQ相关基因的基因组结构维持机制

基本信息

批准号：
13206003
负责人：
関政幸
金额：
$ 3.33万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13206003/
关键词：
RecQ Mms4 組換え合成致死 Sgs1

项目摘要

出芽酵母SGS1は、3つのヒトRECQ遺伝病原因遺伝子の相同遺伝子であり、ヒトと酵母で"ゲノム不安定化"という共通の表現型が観察される。本研究では、SGS1とその周辺で働く遺伝子群を同定し、解析する。当初計画としては、1)既に複数単離した"sgs1破壊株と合成致死となる変異株"の全ての原因遺伝子をクローニングする。2)合成致死株の致死性を多コピーで抑制する酵母ゲノム遺伝子を同定する。3)1,2)で得られた情報から遺伝子破壊株を作製し、sgs1変異との関係を決定する計画だった。【13年度の成果】1)についてはMMS4,SRS2遺伝子のクローニングに成功した。しかし、1)の一部の計画は中止した。2)についてはsgs1-srs2株の合成致死性を抑制できる多コピー抑制遺伝子のスクリーニングを行い、少なくとも現在までに"致死性を抑制する2つのゲノム断片(ZAP1〜TDH1,YDL381C-A〜EFT2)"を得ており、この中に複数含まれるどのORFが抑制活性を有するか同定中である。3)についてはmms4株の解析より、「MMS4はSGS1と同様にDNA組換え修復経路で働くこと」、「大腸菌のHolliday junctionを切断するRusAタンパク質をmms4株に発現させるとmms4株における修復欠損が回復すること」、「相同染色体間の組換えは、DNA傷害剤の存在下に、mms4株では野生型の5倍亢進されること」を明らかにした。つまり、Mms4は全ての組換えに機能を果たすのではなく、ある特定の基質中のHolliday junctionを切断することが重要であることを本研究で初めて示唆できた。

SGS1是遗传疾病的三种人RECQ基因的猫基因，在人类和酵母中观察到一种称为“基因组不稳定性”的共同表达类型。在这项研究中，鉴定和分析了SGS1及其周围基因组。最初，将所有因果基因克隆在1）已经孤立的“ SGS1破坏了合成的股份和突变股份”。 2）同。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。 3）计划是从1,2中获得的信息中创建一个基因破坏库存，并确定与SGS1突变的关系。 [2013财年结果] 1）成功克隆MMS4和SRS2基因。但是，某些计划1）被取消。关于2），进行了可以控制SGS1-SRS2共享的合成和致死性的多拷贝抑制基因的筛选，并且至少两个基因组片段（ZAP1〜TDH1，YDL381C-A〜EFT2）进行了抑制。 “已获得，并确定在此中包含哪些ORF是抑制活性。 3）根据对MMS 4股的分析，“ MMS4在DNA重组维修途径（如SGS1）和“切割eScherichia coli中holliday交界处的RUSA蛋白（在MMS 4股中表达）。同源染色体是，MMS份额的增强DNA损伤剂的存在是5倍。”换句话说，这项研究可能表明，MMS4对于在特定底物中切断霍利迪交界处很重要，而不是实现所有重组。