GalNAc:ポリペプチド・トランスフェラーゼの発現抑制による癌治療法の開発

通过抑制GalNAc：多肽转移酶的表达开发癌症治疗

• 批准号: 08266254
• 负责人: 日野田 裕治
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08266254/
• 关键词: GalNAcトランスフェラーゼ; アンチセンス抑制; O-グリカン; 免疫遺伝子療法

ムチン型糖蛋白による癌細胞保護作用は、主にN-acetylgalact osamine(GalNAc)の結合に基く直線的で硬い構造によって細胞表面抗原が隠蔽されることによるとされる。従って、癌細胞におけるその全合成の阻害は新しい癌治療法の一つとなる可能性がある。本研究ではヒト胃癌細胞株JRSTに,アンチセンスGalNAc-T1 cDNAを導入しトランスフェクタントを得、これを用いた以下の結果を得た。(1)得られたアンチセンストランスフェクタントにおいてGalNAc-T1 mRNA及び蛋白の発現レベルの低下が認められた。(2)アンチセンストランスフェクタントのin vitroにおけるNK及びLAK細胞に対する感受性が著明に増強した。(3)アンチセンストランスフェクタントは、in vitroでは対照細胞と比較して増殖能に差を認めなかったが、SCIDマウスを用いたin vivo腫瘍増殖能では著明な低下を示した。この増殖低下は抗アシアロGM1抗体投与により消失した。現在までにGalNAc transferaseファミリーに属する3種のアイソザイム(GalNAc-T1,-T2,-T3)がクローニングされている.本研究ではGalNAc-T1のみの発現を抑制したにもかかわらず,著明なNK及びLAK細胞感受性の増強が認められた.この理由として,GalNAc-T1と-T2あるいは-T3の塩基配列に高い相同性をもつ領域が存在することにより,GalNAc-T1のアンチセンスmRNAが他のGalNAc transferaseの発現を抑制している可能性が考えられた.また,これまでにGalNAc-T1,-T2,及び-T3の間で基質特異性の差異が示されていることから,GalNAc-T1の基質特異性が-T2,-T3に比べ腫瘍細胞のNK感受性に優位に関与している可能性が推察される.

粘蛋白型糖蛋白的癌细胞保护作用被认为是细胞表面抗原被基于N-乙酰基乳糖蛋白（GALNAC）结合的线性和硬结构所隐藏。因此，抑制癌细胞中所有合成的抑制可能是新的癌症治疗方法之一。在这项研究中，将人类胃癌细胞的股票JRST引入到反义的GalNAC-T1 cDNA中以获得转染剂，并使用了以下结果。 （1）获得的抗敏化纤维显示出GalNAC-T1 mRNA和蛋白质的表达水平降低。 （2）在体外对NK和LAK细胞的敏感性已显着增加。 （3）与体外对比细胞相比，抗敏感的转染剂没有识​​别增殖能力，但使用SCID小鼠显示体内肿瘤生长的显着降低。抗 - 亚洲GM1抗体给药消失了这种增殖。迄今为止，属于Galnac转移酶家族的三种眼虫（GalNAC -T1，-T2，-T3）在这项研究中仅被克隆，只有Galnac -t1仅抑制了表达式，但是NK却出色观察到Lak细胞敏感性的增加，原因是Galnac-T1的反义mRNA是GalNAC-T1反义mRNA的存在，这是因为有一个具有高同源序列的区域GalNAC转移酶的表达也被抑制，因为底物特异性的差异已经在GalNAC -T1，-T2和-T3之间显示与-t2和-t3相比，肿瘤细胞的敏感性。

项目成果

Makiguchi,Y.,et al: "Effect of MUC1 mucin,an anti-adhesion molecule,on tumor cell growth." Jpn.J.Cancer Res.87. 505-511 (1997)

Makiguchi, Y. 等人：“MUC1 粘蛋白（一种抗粘附分子）对肿瘤细胞生长的影响。”

Takai,S.,et al: "A human UDP-GalNAc : polypeptide N-acetylgalactosaminyl transferase-type-1 gene is located at the chromosomal region 18q12.1." Human genetics. (in press). (1997)

Takai,S.,et al：“人类 UDP-GalNAc：多肽 N-乙酰半乳糖胺基转移酶 1 型基因位于染色体区域 18q12.1。”

Takai,S.,et al.: "Assignment of the human UPD-GalNAc : polypeptide. N-acetylgalactosaminyl-transterase-type-2 gene to chromosomal region 1q42 by fluorescence in situ hybridization." Genomics. (in press). (1997)

Takai,S.,et al.：“通过荧光原位杂交将人 UPD-GalNAc：多肽。N-乙酰半乳糖胺基转移酶 2 型基因分配到染色体区域 1q42。”

Adachi,T.,et al.: "Increased sensitivity of gastric cancer cells to NK and LAK cells by antisense suppression of UDP-GalNAc : polypeptide N-acetylgalactosaminyl-transterase-type-I gene is located at the chromosomal region 18q12,1." J.Immunol.(in press). (

Adachi,T.,et al.：“通过反义抑制 UDP-GalNAc 增加胃癌细胞对 NK 和 LAK 细胞的敏感性：多肽 N-乙酰半乳糖胺基转移酶 I 型基因位于染色体区域 18q12,1。