大腸癌新規マイクロRNAマーカーの開発

结直肠癌新 microRNA 标记物的开发

基本信息

批准号：
23659300
负责人：
日野田裕治
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23659300/
关键词：
miRNA miR-1826 miR-493 Bladder cancer Renal cell carcinoma Tumor suppressor gene

项目摘要

本年度は次の点を明らかにした。1)ホルマリン固定パラフィン包埋切片を使用してマイクロダイセクションを行い、いくつかの癌関連マイクロRNA(miRNA)発現レベルを定量PCRで検討した。特許の関係で明確な記述はできないが、あるmiRNAでは、癌部と非癌部の発現レベルが同等か非癌部のほうが高い症例があり、HE標本で観察したところ、非癌部の間質細胞が非常に増加していることがわかった。さらに細胞レベルでダイセクトを行い発現レベルを検討中である。2)MiR-1826が膀胱癌組織で発現低下しており、pTおよびgradeと関連した。MiR-1826の標的遺伝子としてCTNNB1,VEGFC,MEK1を明らかにした。MiR-1826導入細胞では、viabilityおよびinvasion/migrationの低下、アポトーシスおよびG1アレストの増加を認めた。CTNNB1あるいはMEK1をsiRNAでノックアウトすると、miR-1826導入と同様の結果を示した。これらの結果は、miR-1826が膀胱癌において、がん抑制遺伝子として機能していることを示唆する。さらに、miR-1826がVHLが不活化されている腎細胞癌においても、膀胱癌と同様の役割をしていることを明らかにした。3)MiR-493が膀胱癌細胞株および手術摘出組織で低下していることを明らかにした。MiR-493導入細胞は増殖能および運動能の低下を示した。さらに、MiR-493の標的遺伝子としてFrizzled-4,RhoCを同定した。これらの結果は、miR-493が膀胱癌において癌抑制遺伝子として働いていることを示唆した。

今年，揭示了以下几点。 1）使用福尔马林固定的石蜡包裹的片段进行微二的截面，并使用定量PCR检查了一些癌症相关的微RNA（miRNA）表达水平。尽管由于专利而无法清楚地描述，但在一个miRNA中，在某些情况下，癌症和非癌部位的表达水平是等效的，或者非癌症区域较高，而当观察到在他的标本是非癌者的间隙。此外，我们正在考虑通过在细胞水平下降来考虑表达水平。 2）miR-1826在膀胱癌组织中有所下降，与PT和等级有关。 CTNNB1，VEGFC和MEK1被揭示为miR-1826的靶基因。 miR-1826细胞已显示生存力和发明/迁移的降低，凋亡和G1碱的增加。用siRNA敲出CTNNB1或MEK1的结果与引入miR-1826相同。这些结果表明，miR-1826在膀胱癌中充当癌症抑制基因。此外，MiR-1826还表明，它在VHL被灭活的肾细胞癌中起着与膀胱癌的作用相同。 3）据揭示了miR-493在膀胱癌细胞和手术切除组织中正在减少。 miR-493细胞已显示出增殖和运动能力降低。此外，毛躁4和RHOC被确定为miR-493的靶基因。这些结果表明，miR-493是膀胱癌的癌症抑制基因。