チロシンリン酸化酵素関連分子の遺伝子ターゲティング法によるがん化分子機構の解析

利用酪氨酸激酶相关分子的基因靶向分析致癌的分子机制

基本信息

批准号：
08265259
负责人：
八木健
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08265259/
关键词：
チロシンリン酸化酵素 Fyn ジーンターゲティング RNA結合タンパク質 Src

项目摘要

チロシンリン酸化活性は細胞の増殖、分化に重要な情報伝達系であり、細胞のがん化との関連性も示唆されている。本研究ではチロシンリン酸化酵素のFynが実際に細胞のがん化の過程でどの様に機能しているかを解析する目的で、Fyn結合分子の単離・解析を行った。その結果、再現性よく強いlacZ遺伝子転写活性を示すクローンを5種類選別した。この5種類の遺伝子配列を決定したところ、Srcファミリーと結合することが報告されているhnRNPが得られており、我々の用いた酵母タンパク質相互作用検出系が実際に機能していることが明らかとなった。また、DNA結合タンパク質のヒトSON遺伝子と相同なクローン、マウスt-complexの不妊染色体領域に位置するtctex-1遺伝子が得られた。他の2種類(TH34,TH82)の遺伝子は現在報告されていない遺伝子であった。ノーザンブロット法によるmRNAのマウス組織分布を調べたところ、TH34は脳で発現が強いが他の組織についても弱い発現が認められるものであった。また、TH82は脳で比較的強い発現が認められるものの、心臓、筋肉においても発現が認められた。得られたTH82の全塩基配列を決定した結果、線虫で得られているfox-1遺伝子と最も相同性が高く、RNA結合タンパク質のファミリーに属する新たな分子であることが明らかとなった。本研究により、チロシンリン酸化酵素のFynの細胞内シグナル伝達分子として新たなRNA結合タンパク質TH82が単離された。チロシンリン酸化酵素の下流シグナル伝達分子としてのRNA結合タンパク質は、現在までのリン酸化シグナルカスケードとは異なったシグナルがRNAに直接作用する可能性を示唆するものとして興味深い。

酪氨酸磷酸化活性是细胞增殖和分化的重要信号转导系统，也被认为与细胞癌变有关。在本研究中，我们分离并分析了Fyn结合分子，以分析酪氨酸激酶Fyn在细胞癌变过程中的实际功能。结果，选择了 lacZ 基因转录活性强、重现性好的 5 种克隆。当我们确定了这五种类型的基因序列时，我们获得了hnRNP，据报道它与Src家族结合，很明显我们使用的酵母蛋白相互作用检测系统确实发挥了作用。此外，还获得了与人类SON基因、DNA结合蛋白和位于小鼠t复合体不育染色体区域的tctex-1基因同源的克隆。另外两个基因（TH34 和 TH82）目前尚未报道。当我们通过Northern blotting研究小鼠组织mRNA分布时，我们发现TH34在大脑中强表达，但在其他组织中也有弱表达。此外，虽然在脑中观察到相对较强的TH82表达，但在心脏和肌肉中也观察到表达。 TH82的整个碱基序列被确定，表明它是一个属于RNA结合蛋白家族的新分子，与秀丽隐杆线虫中发现的fox-1基因具有最高的同源性。在这项研究中，分离出一种新的RNA结合蛋白TH82，作为酪氨酸激酶Fyn的细胞内信号转导分子。 RNA结合蛋白作为酪氨酸激酶的下游信号分子很有趣，因为它们表明不同于当前磷酸化信号级联的信号可能直接作用于RNA。