遺伝子欠損マウス作製による学習・本能行動に関与する分子機構の解析

通过创建基因缺陷小鼠来分析涉及学习和本能行为的分子机制

• 批准号: 07260214
• 负责人: 八木 健
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07260214/
• 关键词: Fyn; NMDAレセプター; ジーンターゲティング; ジーントラップ法; 学習; 情動; 聴覚性痙攣発作; ピューロマイシン; Fyn; NMDAレセプター; ジーンターゲティング; ジーントラップ法; 学習; 情動; 聴覚性痙攣発作; ピューロマイシン

本年度は、当初に計画した研究目的以上の成果をあげることができた。ES細胞での遺伝子操作技術の開発においては、新たな薬剤ピューロマイシンによる選択法を開発して、二重に遺伝子操作したES細胞より変異マウスを作製することに成功するとともに(BBRC,1995)、PCR法を用いた新たなジーントラップ法を確立し報告した(Tarnsgenic Res.,1995)。また、ジーンターゲティング法により学習・記憶関連分子であるNMDA受容体サブタイプの遺伝子欠損マウスを作製し、ε1で海馬長期増強の減少による空間学習の異常(Nature,1995)、ε4で自発的行動の低下(Mol.Brain Res.,in press)、δ2で小脳長期抑圧の減少による運動障害(Cell,1995)を明らかにし報告した。また、現在までに種々の行動異常を報告しているFyn欠損マウスについては、新たに聴覚性痙攣発作の異常(Mol.Brain Res.,1995)、学習行動過程での情動異常(Mol.Brain Res.,in press)を確認し報告した。現在までこのFynのタンパクレベルでの機能については不明な点が多く、現在までに明らかにされていない細胞内情報伝達系が想定されることより、本年度我々はこのFynに特異的なモノクローナル抗体を作製し、細胞内の局在について解析するとともに(J.Cell Biol.,1996)、この抗体を用いてマウス脳においてFynと結合する分子の単離を行った。現在、行動制御に関連すると予想される新規分子を4種同定することに成功し、解析を進めている。今後これら新規分子の解析により今までに明らかとなっていない哺乳類の学習・本能行動制御に関する新たな分子機構が解明されると期待している。

今年，我们能够取得超出最初的研究目标的结果。在开发ES细胞中的基因工程技术时，我们使用新药物尿霉素开发了一种选择方法，以成功地从双重操纵的ES细胞中产生突变小鼠（BBRC，1995），并使用PCR建立并报告了一种新的基因陷阱方法（Tarnsgenic Res。，1995）。此外，基因靶向产生了具有NMDA受体亚型的基因缺陷小鼠，一种学习和记忆相关的分子，并报告说，由于在ε1的长期海马效力降低而导致的空间学习异常（自然，1995年），自然行为在iM smarthem prangie tentry prangie termartime shore termant and shore is。小脑抑制Δ2（Cell，1995）。此外，在迄今已报道各种行为异常的FYN缺陷小鼠中，我们证实并报告了听觉性癫痫发作的新异常（Mol。BrainRes。，1995）和学习行为过程中的情绪异常（Mol。BrainRes。，印刷中）。关于迄今为止FYN功能的蛋白质水平以及迄今为止尚未揭示的细胞内信号传导系统的蛋白质水平有许多未知数，因此，今年我们生产了一种针对FYN的单克隆抗体，分析了其细胞内定位（J. Cell Biol。目前，我们已经成功识别了四个与行为控制有关的新型分子，目前正在进行分析。我们希望对这些新分子的分析能够发现有关哺乳动物学习和本能行为控制的新分子机制。