チロシンリン酸化酵素関連分子の遺伝子ターゲティング法によるがん化分子機構の解析

利用酪氨酸激酶相关分子的基因靶向分析致癌的分子机制

• 批准号: 08265259
• 负责人: 八木 健
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08265259/
• 关键词: チロシンリン酸化酵素; Fyn; ジーンターゲティング; RNA結合タンパク質; Src; チロシンリン酸化酵素; Fyn; ジーンターゲティング; RNA結合タンパク質; Src

チロシンリン酸化活性は細胞の増殖、分化に重要な情報伝達系であり、細胞のがん化との関連性も示唆されている。本研究ではチロシンリン酸化酵素のFynが実際に細胞のがん化の過程でどの様に機能しているかを解析する目的で、Fyn結合分子の単離・解析を行った。その結果、再現性よく強いlacZ遺伝子転写活性を示すクローンを5種類選別した。この5種類の遺伝子配列を決定したところ、Srcファミリーと結合することが報告されているhnRNPが得られており、我々の用いた酵母タンパク質相互作用検出系が実際に機能していることが明らかとなった。また、DNA結合タンパク質のヒトSON遺伝子と相同なクローン、マウスt-complexの不妊染色体領域に位置するtctex-1遺伝子が得られた。他の2種類(TH34,TH82)の遺伝子は現在報告されていない遺伝子であった。ノーザンブロット法によるmRNAのマウス組織分布を調べたところ、TH34は脳で発現が強いが他の組織についても弱い発現が認められるものであった。また、TH82は脳で比較的強い発現が認められるものの、心臓、筋肉においても発現が認められた。得られたTH82の全塩基配列を決定した結果、線虫で得られているfox-1遺伝子と最も相同性が高く、RNA結合タンパク質のファミリーに属する新たな分子であることが明らかとなった。本研究により、チロシンリン酸化酵素のFynの細胞内シグナル伝達分子として新たなRNA結合タンパク質TH82が単離された。チロシンリン酸化酵素の下流シグナル伝達分子としてのRNA結合タンパク質は、現在までのリン酸化シグナルカスケードとは異なったシグナルがRNAに直接作用する可能性を示唆するものとして興味深い。

酪氨酸磷酸化活性是细胞增殖和分化的重要信号系统，也有人建议与细胞癌有关系。在这项研究中，我们分离和分析了FYN结合分子，以分析酪氨酸磷酸化酶Fyn在细胞癌过程中的实际功能。结果，选择了五个表现出高度可重现LACZ基因转录活性的克隆。当确定了这五个基因序列时，据报道已获得与SRC家族结合的HNRNP，并发现我们使用的酵母蛋白相互作用检测系统实际上在起作用。此外，还获得了与DNA结合蛋白的人儿子基因同源的克隆，该基因是位于小鼠T-Compempemplex中不育染色体区域的TCTEX-1基因。目前，其他两个基因（TH34，TH82）是未报告的基因。当通过北印迹检查mRNA的小鼠组织分布时，Th34在大脑中得到强烈表达，但在其他组织中也发现了弱表达。此外，尽管TH82在大脑中相对较强，但它在心脏和肌肉中也表达。确定了所获得的Th82的整个碱基序列，并且发现它是一种与在线虫中获得的FOX-1基因同源的新分子，属于RNA结合蛋白的家族。这项研究将新的RNA结合蛋白Th82分离为酪氨酸磷酸化酶Fyn的细胞内信号分子。 RNA结合蛋白作为酪氨酸磷酸化的下游信号分子的感兴趣，这表明信号与迄今为止的磷酸化信号级联不同可能直接作用于RNA。