CskファミリーHylチロシンキナーゼによる細胞分裂異常の分子機構

Csk家族Hyl酪氨酸激酶引起细胞异常分裂的分子机制

基本信息

批准号：
08265250
负责人：
山口直人
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

Src型キナーゼの活性は、増殖因子などの刺激後G_0からG_1期および細胞分裂M期において、それぞれ一過性の活性上昇が見られ、Src型キナーゼの活性はCskによって常に抑制的に調節されている。我々は、Cskと高い相同性をもつHylを単離し、ゲノム構造の解析からCskとファミリーを形成することを明らかにしてきた。また最近、HylはC__-skh__-omologous k__-inase(Chk)へと名称が変更された。本研究では、ヒト血液系細胞を用いて、Chkが細胞増殖に与える作用を検討し、ChkとCskとの同時発現があることを考慮しながら、Src型キナーゼ活性制御機構を調べることを目的とした。1.Chkチロシンキナーゼは、Src型キナーゼ制御作用をもつCskと構造上類似する。我々が作製した単クローン抗体を用いたin vitroキナーゼアッセイの結果、ChkはCskと同様に、Src型キナーゼのC末端チロシン残基をリン酸化し、Src型キナーゼのチロシンリン酸化活性を抑制することがわかった。2.血液細胞と脳ではChkとCsk両者の発現がある。血小板において、ChkとCskの細胞内局在が異なり、ChkはCD36に会合しているLynの活性を局在変化により制御することが分かり、Translocation-controlled negative regulationと名付けた。ChkとCskのSrc型キナーゼへの機能分担を示すことができた。3.ヒト未熟骨髄系KMT-2細胞株にChk過剰発現した細胞は、増殖の遅延・多核化などが見られ、M期染色体分配異常が観察された。Chkの細胞内局在を調べたところ、ChkのみならずCskおよびSrc型キナーゼLynとc-Yesは核内にも存在していた。しかも、M期染色体にそれらは会合していた。Src型キナーゼとその制御機構が染色体の動態変化に関わっている可能性を示すことができた。

SRC型激酶的活性在刺激增殖因子后的鲁ck活性从G_0到G_1时期，细胞分裂M期，SRC型激酶的活性不断地由CSK调节。我们透露，具有高同源性并分析基因组结构的CSK和HYL形成了CSK和一个家庭。最近，Hyl的名称已更改为C __- SKH __- Mogous K __-Inase（CHK）。在这项研究中，考虑到CHK和CSK之间的同时表达，使用基于人体的细胞来检查CHK对细胞增殖的影响，并检查SRC型激酶活性控制机制。 1。CHK酪氨酸激酶类似于具有SRC型激酶对照的CSK。由于使用单个克隆抗体的体外激酶测定，CHK（例如CSK）磷酸化SRC型激酶C酪氨酸的C末端，并抑制SRC型激酶的酪氨酸氧化活性。 2。血细胞和大脑具有CHK和CSK的表达。在血小板中，CHK和CSK之间的细胞内位置不同，发现CHK可以控制位于CD36上的Lyn的活性，局部变化，并将其命名为易位控制的负阴性调节。我们能够显示CHK和CSK SRC型激酶的功能共享。 3。已经观察到在CHK中过度表达在细胞中的CHK中的人类不成熟的骨骨骨骨基骨基骨，例如延迟和增殖的多核化。根据CHK的细胞内部区域，不仅CSK和SRC型激酶Lyn和C-YE都存在于细胞核中。此外，他们遇到了m -chromosoms。可以表明SRC型激酶及其控制机制参与改变动态染色体的可能性。