細胞質分裂に必須な遺伝子の単離

分离胞质分裂必需的基因

基本信息

批准号：
06275205
负责人：
安田秀世
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tokyo University of Pharmacy and Life Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06275205/
关键词：
細胞質分裂温度感受性変異株多核細胞細胞周期

项目摘要

哺乳類細胞の細胞質分裂の制御機構には細胞骨格系を制御する遺伝子を始め様々な遺伝子の関与が予想される。G2期から細胞分裂期(M期)への移行時でのcdc2キナーゼに関する研究からも明らかなように、cdc変異株の使用がこのような遺伝子の特定には強力な手段となり得る。我々は細胞質分裂が高温でおこらないマウス温度感受性変異細胞を単離しその性質を研究した。その結果この細胞,tsFT101細胞は33度ではほぼ野生株と同様に増殖するが39度では核分裂はおこるが細胞質分裂がおこらず、多核細胞となり最大八核までの細胞が観察された。この一核内DNA含量は2Cであり核内でのDNA量の増加、減少は観察されなかった。このことからこのtsFT101細胞は細胞質分裂に必須な遺伝子が変異をおこしている可能性が強く示唆された。しかしこのことがこの細胞が細胞質分裂が高温でいかない直接的原因かどうかはこの細胞の変異遺伝子を同定することが必要である。我々はこれまでにヒトゲノムDNAを薬剤耐性プラスミドとともに変異細胞に移入し薬剤耐性で、高温耐性であるクローンを得、そこから変異を相補できる遺伝子の単離をしてきている。現在この方法をこのtsFT101に適用しこの変異を相補できる遺伝子の単離を試みている。

各种基因，包括控制细胞骨架系统的基因，预计参与哺乳动物细胞胞质分裂的控制机制。 CDC 突变体的使用可以成为识别此类基因的有力工具，对 G2 到有丝分裂（M 期）过渡期间 CDC2 激酶的研究证明了这一点。我们分离了在高温下不发生胞质分裂的小鼠温度敏感突变细胞并研究了它们的特性。结果，这些细胞，即tsFT101细胞，在33度时几乎以与野生型相同的方式增殖，但在39度时，发生核分裂但不发生胞质分裂，细胞变成多核细胞，观察到多达8个细胞核。该单个核中的DNA含量为2C，并且没有观察到核中DNA量的增加或减少。这强烈表明 tsFT101 细胞可能存在胞质分裂必需的基因突变。然而，有必要鉴定该细胞中的突变基因，以确定这是否是细胞在高温下无法进行胞质分裂的直接原因。目前我们已将人类基因组DNA与耐药质粒一起导入突变细胞，获得了耐药、耐高温的克隆，并分离出了可以补充突变的基因。我们目前正在将这种方法应用于 tsFT101，试图分离出可以补充这种突变的基因。