初代培養神経細胞を用いたアルツハイマ-病起因・誘発物質の同定とその性状の解析

使用原代培养的神经元鉴定阿尔茨海默氏病的病因和诱导物并分析其特性

基本信息

批准号：
01658512
负责人：
栗山欣弥
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Kyoto Prefectural University of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

アルツハイマ-病の病因については不明の点が多いが、従来から主として行われてきた形態学的研究の外に、最近では遺伝子レベルでの解析及び神経化学的研究が活発に行われる様になって来ている。本研究ではアルツハイマ-病患者で特に萎縮・変性が強いとされる脳内コリン作働性ニュ-ロンを取り上げ、初代培養したコリン作働性ニュ-ロンに対して抑制的に働く因子がアルツハイマ-患者剖検脳内に存在するかどうかを検討した。1.剖検脳内のニュ-ロン発育又は維持阻害物質を神経細胞系を用いて検討する場合には、まず培地内物質、特に培地に加えた諸種血清蛋白との相互作用が問題となる。従って無血清培地を用いてマウス大脳皮質から得たニュ-ロンの初代培養を試みたところ、7〜10日間は確実に生存することが判明した。2.アルツハイマ-病と確定診断した患者の大脳皮質側頭葉剖検脳の水抽水物を作製し、これを上記1で得た初代培養神経細胞系に適用したところ、明らかな発育抑制を示す物質が検出された。この物質はコリン作働性ニュ-ロンに対して比較的選択性のある抑制を示すものであり、初代培養神経細胞系に適用すると、アセチルコリン含量低下、コリンアセチルトランスフェラ-ゼ活性抑制及びアセチルコリン・ムスカリン受容体の低下などを招来した。上記の各実験を成功させるためには、まず十分量のアルツハイマ-病患者剖検脳組織及びこれの対照となる剖検脳組織を得ることが必要である。現在国内各医療機関を通じてその入手を計ると共に、米国ハ-バ-ド大学医学部Bird教授(神経病理学)の協力を得て、米国からも入手する準備を整えているところである。

关于阿尔茨海默氏病的发病机理，还有许多未知数，但是除了过去主要进行的形态学研究外，遗传分析和神经化学研究最近都变得更加活跃。这项研究检查了胆碱能的NURON，据说在阿尔茨海默氏病患者中特别容易发生萎缩和变性，并检查了阿尔茨海默氏症尸检的大脑中原发性培养的胆碱能NURON的抑制因素。 1。当使用神经元细胞系检查大脑中坏死手术和维持抑制剂时，第一个问题是培养基中的物质之间的相互作用，尤其是添加到培养基中的各种血清蛋白。因此，当使用无血清培养基尝试从小鼠脑皮质获得的神经元的原发性培养物时，发现它们存活了7-10天。 2。制备了对阿尔茨海默氏病的明确诊断患者的脑皮质颞叶尸检的水分，并将其应用于上面1的原发性培养的神经元细胞系，并且检测到明确抑制发育抑制的物质。该物质表现出对胆碱能神经元的相对选择性抑制作用，当应用于原发性培养的神经元时，它导致乙酰胆碱含量较低，抑制胆碱乙酰基转移酶活性和乙酰胆碱 - 毒素受体。为了在上述每个实验中取得成功，有必要先获得足够数量的阿尔茨海默氏病患者的尸检脑组织，并获得尸检脑组织的对照。目前，该公司正在准备通过日本的医疗机构以及美国哈尔德大学医学院的伯德教授（神经病理学）的合作来获取它。