アストログリアにおける神経成長因子(NGF)の生成とその脳虚血に伴う変化の解析

星形胶质细胞神经生长因子（NGF）生成及其与脑缺血相关的变化分析

基本信息

批准号：
04258219
负责人：
栗山欣弥
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kyoto Prefectural University of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

アストログリアにおいて多く産生される神経成長因子(NGF)は、脳虚血に伴う神経細胞死、特に遅発性神経細胞死の発生を抑制することが知られているが、NGFがこれらの虚血部位のアストログリアでどの様な動態を示すのかは知られていない。一方脳虚血時には、虚血部位にアシドーシスが起り、またグルタミン酸が高濃度に検出され、このグルタミン酸が神経細胞死の発生に重要な役割を演じていることが最近明らかになっている。アストログリアはグルタミン酸-グルタミン回路を介して細胞外液中のグルタミン酸を除去する働きを有している。従って本研究では、初代培養を4-6週間継続したアストログリアを用い、アシドーシスと類似の条件下、すなわちpH6.5に24時間曝露した場合、位相差顕微鏡上、軽度の空胞形成が細胞体に認められたが、LDHの細胞外漏出や、[^<14>C]3-メチル-O-グルコースによる測定した細胞内液量には、著変は認められなかった。[^3H]グルタミン酸のアストロサイトへの取り込みはpH低下に依存して減少したが、この低下は培養液のpHを7.4に戻すと、3時間でpH7.4の培養液に曝露したアストロサイトで認められた値に近い数値に戻るのが認められた。また細胞外液中に添加した[^<14>C]グルタミン酸の[^<14>C]グルタミンへの変換も、pH6.5の培養液への曝露により有意に低下したが、培養液のpHを7.4に変えることにより、この代謝転換率の低下は消失した。従って虚血病態下での病巣部位における速やかなアシドーシスの補正は、過剰に放出されたグルタミン酸の除去を介して神経細胞死の進展阻止に有用であると考えられる。現在、この実験系を用いて、NGFの産生やNGFのmRNAのレベルがどの様な変動を示すかを検討中である。

已知在星形胶质细胞中产生的神经生长因子（NGF）抑制与脑缺血相关的神经元细胞死亡的发生，尤其是晚期发作神经元细胞死亡，但尚不清楚NGF如何在这些缺血性部位显示Astroglia的动力学。另一方面，在脑缺血期间，酸中毒发生在缺血部位，并在高浓度下检测到谷氨酸，并且最近发现这种谷氨酸在神经元细胞死亡的发展中起重要作用。星形胶质细胞具有通过谷氨酸谷氨酰胺循环从细胞外液中去除谷氨酸的功能。因此，在这项研究中，当使用星形胶质细胞4-6周并在类似于pH 6.5的条件下暴露于24小时的酸中毒时，在细胞体中观察到了轻度的真空糖的形成，但在LDH或细胞外流体的细胞外渗漏或以[^<14> c] 3-甲基 - 果糖测量的细胞外流体渗漏时没有观察到显着变化。 [^3H]谷氨酸吸收星形胶质细胞的降低取决于pH下降，但发现这种降低恢复到接近在3小时内暴露于pH 7.4培养基中观察到的pH 7.4培养基的值。此外，由于在pH 6.5时暴露于培养溶液时，将[^<14> C]谷氨酸的转化添加到[^<14> c]谷氨酰胺中的[^<14> c]谷氨酰胺的转化大大降低，但是通过将培养溶液的pH pH更改为7.4来消除代谢转化率的降低。因此，在缺血性条件下，在焦点部位快速纠正酸中毒被认为可用于防止神经元细胞死亡通过去除过量释放谷氨酸而进展。我们目前正在使用该实验系统来研究NGF的产生和NGF mRNA水平将如何显示出来。