肥満細胞プライミング現象の生化学的および薬学的評価

肥大细胞启动现象的生化和药物评价

基本信息

批准号：
05671812
负责人：
工藤一郎
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05671812/
关键词：
肥満細胞ホスホリパーゼA_2 抗体プライミング

项目摘要

1)既時型アレルギーの担い手細胞である肥満細胞を、IgE抗体と抗原で刺激したところ、処理2分後に細胞内のcPLA2活性が未処理細胞の約3倍に上昇し、5分後にはコントロールレベルに戻った。この上昇はリン酸化酵素阻害剤スタウロスポリンで処理することにより消失した。また、免疫沈降でcPLA2タンパクのリン酸化の有無を調べたところ、分子量約85KのcPLA2が刺激2分後にはたしかにリン酸化されるが、5分後に脱リン酸化されることを見いだした。この経時変化はロイコトリエンC4産生の経時変化と一致した。これらの結果は、抗原抗体激した肥満細胞ではcPLA2がリン酸かされ活性化することを示唆しており、遺伝子増幅していない細胞で、刺激連関でcPLA2が活性化することを示した最初の例である。2)肥満細胞を長時間抗原抗体刺激し、cPLA2の量を免疫的に調べた。刺激10時間から30時間でcPLA2量が数倍に増加することを観察した。このことは、抗原抗体刺激で肥満細胞がプライミングされ、アラキドン酸カスケードを作動しやすいように成っていることを示唆している。3)肥満細胞が放出すること、あるいは肥満細胞に作用すると脱顆粒反応を惹起することが解っているII型PLA2で、培養肥満細胞を刺激したところ、濃度依存的にIP3産生が惹起された。これら、II型PLA2がリガンド的に作用することを示唆している。

1）当肥大细胞是主要的过敏细胞时，会被IgE抗体和抗原刺激，但是在处理2分钟后，CPLA2在细胞中的活性增加了约3倍未经处理的细胞，并在5分钟内进行了控制水平。通过使用磷酸抑制剂星形孢菌素加工而丧失了这种上升。另外，当CPLA2蛋白通过免疫沉淀的磷酸化磷酸化时，发现CPLA2的分子量约为85K，肯定是在两分钟后磷酸化的，但在5分钟后是右旋。这个时间与白三烯C4生产时间的时间一致。这些结果表明，CPLA2在抗原抗体中进行了细胞和激活，表明CPLA2在尚未遗传放大的细胞中激活。 2）长时间刺激抗原抗体，并长时间检查了CPLA2的量。观察到CPLA2在10小时至30小时内增加了几次。这表明抗原 - 抗体刺激使肥大细胞启动了肥大细胞，以使Arakidonate级联反应易于操作。 3）II -Type PLA2，可以理解，肥大细胞被释放或作用于肥大细胞，导致脱粒反应，而IP3产生是由刺激的培养培养基受精细胞引起的。这表明这些II型PLA2在配体中起作用。