アクチンに形成される場で無生物は走るか?

无生命的物体可以在肌动蛋白形成的场中运行吗?

基本信息

  • 批准号:
    16657043
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.11万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    2004
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2004 至 2005
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

1.アクリルアミドビーズの運動ミオシンVの頭部に蛍光ラベルすることができ、そのラベルはミオシンVの活性に影響しない。カルシウム存在下では、このラベルされたミオシンVは運動しない。しかし、その系に蛍光性アクリルアミドビーズ(正電荷をもつ)を加えると、そのビーズはアクチンフィラメントに沿って一方向に長距離運動する。この発見は非常に意外なものであったので、間違いない現象であることを確認するために多くの観察を重ねた。その結果、運動速度はミオシンVの数分の1であるものの、間違いなく一方向の運動が起こることを確認できた。ミオシンVとビーズを別の蛍光色素で染色し、それらを同時に観察するために、光学顕微鏡の改造を現在進めている。この顕微鏡観察で、ミオシンVはやはり運動せず、ビーズのみが運動することがはっきりした段階で論文にまとめる。2.ミオシンVのカルシウム制御本来の目的とは異なるが、上記の研究に関連してミオシンVの運動活性のカルシウム制御機構についても研究を行った。ミオシンVにカルシウムを加えると、1重鎖当たり1個のカルモジュリンが解離する。従って、6つのIQモチーフのうちこの解離するカルモジュリンを結合する特異的なIQモチーフが存在するはずである。その同定を行った。ミオシンVをプロテナーゼKで消化すると、±カルシウムで異なる部位に切断が起こることを見出した。+カルシウムによりカルモジュリンが解離し、むき出しになったIQモチーフで切断が起こるように思われた。詳しい解析の結果、特異的なIQモチーフと次のIQモチーフの境界付近で切断が起こることが判明した。この現象を利用して特異的IQモチーフが同定でき、2番目のIQモチーフからカルモジュリンが解離することが結論付けられた。この成果はBiochemistry誌に投稿した。
1。丙烯酰胺珠的动机可以在肌球蛋白V的头上荧光标记,并且标签不会影响肌球蛋白V的活性。在存在钙的情况下,该标记为肌球蛋白V不运动。但是,当将荧光丙烯酰胺珠(带有正电荷)添加到系统中时,珠子沿肌动蛋白丝沿一个方向移动。这一发现非常令人惊讶,并且进行了许多观察结果以确认这是一种现象。结果,尽管运动的速度是肌球蛋白V的一部分,但已确认无疑是单向运动。目前,我正在对光学显微镜进行修改,以用另一种荧光染料染色肌球蛋白V和珠子,并同时观察它们。这种显微镜观察表明,肌球蛋白V不会移动,只有珠子进行运动,并且论文在纸上总结了它们。 2。尽管肌球蛋白V钙控制的最初目的与最初的目的不同,但我们还研究了肌球蛋白V与上述研究相关的肌球蛋白V运动活性的钙控制机理。将钙添加到肌球蛋白V中会使每个重链分离一个钙调蛋白。因此,在六个智商基序中,应该有一个特定的智商基序来结合这种分离的钙调蛋白。进行了识别。我们发现,用蛋白酶K的肌球蛋白V消化会在±钙的不同位点引起裂解。 +钙离解的钙调蛋白和裂解似乎发生在暴露的智商基序中。详细的分析表明,裂解发生在特定智商基序和下一个智商基序之间的边界附近。这种现象用于识别特定的智商基序,得出的结论是,钙调蛋白从第二个智商基序解离。该结果已发布到生物化学杂志上。

项目成果

期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2005
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    H.Koide;T.Kinoshita;Y.Tanaka;G.Meyer zu Horste;A.Miyagi;T.Ando;安藤敏夫;安藤敏夫
  • 通讯作者:
    安藤敏夫
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2005
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    H.Koide;T.Kinoshita;Y.Tanaka;G.Meyer zu Horste;A.Miyagi;T.Ando;安藤敏夫
  • 通讯作者:
    安藤敏夫
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  • 通讯作者:
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  • 通讯作者:
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知道了