アクチンに形成される場で無生物は走るか?

无生命的物体可以在肌动蛋白形成的场中运行吗？

基本信息

批准号：
16657043
负责人：
安藤敏夫
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

1.アクリルアミドビーズの運動ミオシンVの頭部に蛍光ラベルすることができ、そのラベルはミオシンVの活性に影響しない。カルシウム存在下では、このラベルされたミオシンVは運動しない。しかし、その系に蛍光性アクリルアミドビーズ(正電荷をもつ)を加えると、そのビーズはアクチンフィラメントに沿って一方向に長距離運動する。この発見は非常に意外なものであったので、間違いない現象であることを確認するために多くの観察を重ねた。その結果、運動速度はミオシンVの数分の1であるものの、間違いなく一方向の運動が起こることを確認できた。ミオシンVとビーズを別の蛍光色素で染色し、それらを同時に観察するために、光学顕微鏡の改造を現在進めている。この顕微鏡観察で、ミオシンVはやはり運動せず、ビーズのみが運動することがはっきりした段階で論文にまとめる。2.ミオシンVのカルシウム制御本来の目的とは異なるが、上記の研究に関連してミオシンVの運動活性のカルシウム制御機構についても研究を行った。ミオシンVにカルシウムを加えると、1重鎖当たり1個のカルモジュリンが解離する。従って、6つのIQモチーフのうちこの解離するカルモジュリンを結合する特異的なIQモチーフが存在するはずである。その同定を行った。ミオシンVをプロテナーゼKで消化すると、±カルシウムで異なる部位に切断が起こることを見出した。+カルシウムによりカルモジュリンが解離し、むき出しになったIQモチーフで切断が起こるように思われた。詳しい解析の結果、特異的なIQモチーフと次のIQモチーフの境界付近で切断が起こることが判明した。この現象を利用して特異的IQモチーフが同定でき、2番目のIQモチーフからカルモジュリンが解離することが結論付けられた。この成果はBiochemistry誌に投稿した。

1、丙烯酰胺珠上运动肌球蛋白V的头部可进行荧光标记，且标记不影响肌球蛋白V的活性。在钙存在的情况下，这种标记的肌球蛋白 V 不会移动。然而，当荧光丙烯酰胺珠（带正电荷）添加到系统中时，珠子会沿着肌动蛋白丝在一个方向上移动很长的距离。这一发现是如此出乎意料，以至于进行了许多观察来证实这是一个明确的现象。结果，虽然移动速度只是肌球蛋白V的几分之一，但我们能够确认移动确实发生在一个方向上。我们目前正在改造光学显微镜，用不同的荧光染料对肌球蛋白 V 和珠子进行染色并同时观察它们。通过这种显微观察，我们将在明确肌球蛋白V不移动、只有珠子移动的阶段发表论文。 2.肌球蛋白V的钙调节虽然这与最初的目的不同，但结合上述研究，我们还研究了肌球蛋白V运动活性的钙调节机制。当钙添加到肌球蛋白 V 中时，每条重链有一个钙调蛋白解离。因此，在六个 IQ 基序中，必须有一个特定的 IQ 基序与这种解离的钙调蛋白结合。进行了鉴定。我们发现，当肌球蛋白 V 用蛋白酶 K 消化时，根据 ± 钙离子的不同，在不同位点发生裂解。 + 钙解离钙调蛋白，并且切割似乎发生在暴露的 IQ 基序处。详细分析表明，裂解发生在特定 IQ 基序和下一个 IQ 基序之间的边界附近。利用这种现象，可以识别特定的 IQ 基序，并得出结论，钙调蛋白与第二个 IQ 基序解离。该结果已提交给《生物化学》杂志。

项目成果

期刊论文数量（6）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

走査型プローブ顕微鏡最新技術と未来予測(森田清三編集)4章5節高速SPM

扫描探针显微镜：最新技术与未来预测（森田精三主编）第4章第5节高速SPM

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
影响因子：
0
作者：
H.Koide;T.Kinoshita;Y.Tanaka;G.Meyer zu Horste;A.Miyagi;T.Ando;安藤敏夫;安藤敏夫
通讯作者：
安藤敏夫

わかる実験医学シリーズバイオイメージングがわかる-細胞内分子を観察する多様な技術とその原理(高松哲郎編集)高速AFM-タンパク質分子の動的振舞いの観察トピックス編3章

了解实验医学系列了解生物成像 - 观察细胞内分子的各种技术和原理（高松哲朗主编）高速 AFM - 蛋白质分子动态行为的观察专题第 3 章

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
影响因子：
0
作者：
H.Koide;T.Kinoshita;Y.Tanaka;G.Meyer zu Horste;A.Miyagi;T.Ando;安藤敏夫
通讯作者：
安藤敏夫

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0
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通讯作者：
渡邉剛志

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发表时间：
2017
期刊：
影响因子：
0
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通讯作者：
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DOI：
发表时间：
2017
期刊：
影响因子：
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丸山慎太郎;鈴木花野;今村元紀;佐々木輝;松波秀行;水谷健二;齋藤靖子;今井ファビアナ・リカ;石塚(桂)芳子; 染谷(木村)友美;白水美香子;内橋貴之;安藤敏夫;山登一郎;村田武士;Takeshi Murata
通讯作者：
Takeshi Murata