生殖毒性評価・後代検定技術としての生殖細胞系列の完全連続培養技術の開発

生殖毒性评价及子代检测技术等完整种系连续培养技术的开发

基本信息

批准号：
13876059
负责人：
佐藤英明
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

1)卵子の退行抑制、成熟促進、血管増殖に係わるヒアルロン酸合成酵素遺伝子やヒアルロン酸結合タンパク質の解析を行い、HAS1、HAS2を卵丘細胞に、HAS3を卵母細胞に同定するとともにその構造を決定した。また、HAS2の発現調節領域の構造を決定した。ヒアルロン酸・CD44のシグナルがギャップジャンクション蛋白質Cx43のチロシンリン酸化を誘導し、ギャップジャンクションを閉鎖させるカスケードを明らかにした。ギャップジャンクションの閉鎖がどのように卵成熱を誘起するかについていくつかの仮説をたて解析を進めている。2)卵子・卵丘細胞におけるCD44の分布を明らかにした。3)HAS2遺伝子の転写調節領域に卵胞刺激ホルモンに応答する領域があると予想し、解析し、構造を決定した。4)Fas・Fasリガンドシステムが卵胞で発現し、卵子の死滅を誘導することをマウスとブタですでに明らかにした。さらに透明帯にFas・Fasリガンドシステムの発現を抑制する効果があることを明らかにし、このような透明帯の機能を担う分子の同定に努力し、ヒアルロン酸であることを明らかにした。5)始原生殖細胞におけるIgf2rのインプリンティングのプロファイルと調節系を明らかにした。6)cAMPの減数分裂再開始抑制が受精能・発生能の上昇に係わることを明にした。7)マウス体細胞に胚性幹細胞の細胞質を導入し、多分化能をもつ細胞に分化させることに成功した。

1）我们分析了参与抑制卵子退化、促进成熟和血管增殖的透明质酸合酶基因和透明质酸结合蛋白，鉴定了卵丘细胞中的HAS1和HAS2以及卵母细胞中的HAS3，并阐明了它们的结构。决定了。我们还确定了HAS2表达调控区的结构。我们揭示了乙酰透明质酸/CD44信号诱导间隙连接蛋白Cx43酪氨酸磷酸化并关闭间隙连接的级联反应。我们目前正在基于几种关于间隙连接的闭合如何诱导卵子发生的热量的假设进行分析。 2)我们阐明了CD44在卵母细胞和卵丘细胞中的分布。 3）我们预测HAS2基因的转录调控区中有一个对卵泡刺激素有反应的区域，并对其进行了分析，并确定了其结构。 4）我们已经在小鼠和猪中证明，Fas/Fas配体系统在卵泡中表达并诱导卵母细胞死亡。此外，他们还发现透明带具有抑制Fas/Fas配体系统表达的作用，并致力于鉴定负责透明带功能的分子，该分子被揭示为透明质酸。 5)我们阐明了Igf2r在原始生殖细胞中的印迹谱和调控系统。 6）研究表明，cAMP对减数分裂重新启动的抑制与生育力和发育能力的增加有关。 7）我们成功地将胚胎干细胞胞浆导入小鼠体细胞中，并使其分化为多能细胞。