ヒト子宮頸管熟化に関わるヒアルロン酸合成酵素の遺伝子発現および分子量変化の意義

透明质酸合酶基因表达及分子量变化参与人宫颈成熟的意义

基本信息

批准号：
12770894
负责人：
小川正樹
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Akita University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770894/
关键词：
子宮頚部熟化ヒアルロン酸ヒアルロン酸合成酵素 IL-1β IL-8 子宮頚管熟化

项目摘要

非妊娠時および分娩時の子宮頚部組織の一部を用いて、組織中のヒアルロン酸合成酵素遺伝子(HAS)発現を、Quantitative Real Time RT-PCRを行ない測定した。その結果、(1)子宮頚部にHAS1、HAS2、HAS3が発現すること、(2)HAS2、HAS3の発現が、HAS1の発現に比較して、増強していること、(3)HAS2の発現は、分娩直後の子宮頚部において、著明に低下することが認められた。以上より、子宮頚部におけるHASの発現は、分娩時と非妊娠時において異なることから、HASが子宮頚部熟化に関与することが推定された。さらに、HAS抗体を用いた免疫組織学的検討により、その局在部位は、子宮頚部線維芽細胞であることが確認された。また、培養ヒト子宮頚部線維芽細胞を用いて、HAS発現の変化を検討した。妊娠後期の子宮頚部熟化時に子宮頚部組織に誘導されるサイトカインおよびエストロゲン、プロゲステロンを培養液中に添加し、熟化した子宮頚管の状びを再現した。その結果、IL-1β添加によりHAS2、HAS3発現が、濃度依存性および時間依存性に増強した。IL-8、エストロゲン、プロゲステロン添加では、発現の変化は認められなかった。また、HAS1の発現は認められなかった。以上より、子宮頚部熟化時のHA代謝に関与するのはHAS2、HAS3であり、IL-1βがその作用を増強させるケモカインであることが推定された。さらに、細胞内シグナル伝達経路を検討する目的で、IL-1レセプター・アンタゴニストおよびactivating protein-1(AP-1)系を特異的に抑制する物質であるSB203580を用いて同様の検討を行ない、IL-1βは、IL-1レセプターとAP-1系を介して、HAS発現を引き起こすことが推定された。われわれの既報の所見、および以上の結果より、IL-1βがHAS発現を引き起こすことにより、ヒアルロン酸産生を促進する。特に低分子ヒアルロン酸を誘導するHAS2およびHAS3が、この経路に関与していることが、推定された。したがって、HAS2およびHAS3の発現を促すことにより子宮頚部の熟化を引き起こすことが理論上可能であることが示唆され、今後は新規薬剤の開発に向けた検討を行う予定である。

使用定量实时 RT-PCR 使用非妊娠期间和分娩期间的部分子宫颈组织测量组织中透明质酸合酶基因 (HAS) 的表达。结果显示：(1)HAS1、HAS2、HAS3在宫颈中表达，(2)HAS2、HAS3的表达较HAS1的表达增强，(3)HAS2的表达明显减少。分娩后立即在子宫颈中观察到。综上所述，由于HAS在宫颈中的表达在分娩和未妊娠之间存在差异，因此推测HAS参与宫颈成熟。此外，使用HAS抗体的免疫组织学检查证实了局部部位是宫颈成纤维细胞。我们还使用培养的人宫颈成纤维细胞检查了 HAS 表达的变化。将妊娠晚期子宫颈成熟过程中在子宫颈组织中诱导的细胞因子、雌激素和黄体酮添加到培养基中，以再现成熟子宫颈的形状。结果，添加IL-1β以浓度和时间依赖性方式增强HAS2和HAS3的表达。添加 IL-8、雌激素或黄体酮后未观察到表达变化。此外，没有观察到HAS1的表达。由此推测HAS2和HAS3参与宫颈成熟过程中的透明质酸代谢，IL-1β是增强该作用的趋化因子。此外，为了检查细胞内信号转导途径，我们使用SB203580进行了类似的研究，SB203580是一种IL-1受体拮抗剂，也是一种特异性抑制激活蛋白1（AP-1）系统的物质，推测会诱导-1β。 HAS 通过 IL-1 受体和 AP-1 系统表达。根据我们之前报道的发现和上述结果，IL-1β通过诱导HAS表达来促进透明质酸的产生。特别是，诱导低分子量透明质酸的 HAS2 和 HAS3 被认为参与了该途径。因此，理论上认为通过促进HAS2和HAS3的表达来诱导宫颈成熟是可能的，未来我们计划针对新药的开发进行研究。