哺乳類の減数分裂の開始と再開始を制御する性腺因子

控制哺乳动物减数分裂启动和重新启动的性腺因子

基本信息

批准号：
10160202
负责人：
佐藤英明
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10160202/
关键词：
マウスブタ減数分裂卵成熟卵巣 maturation-promoting tactor MAP Kinase ヒアルロン酸

项目摘要

1) MAPキナーゼがブタ卵成熟誘起の中心的役割を果たすことを明らかにした。特に卵核胞を単離する方法を開発し、ウエスタンブロット法により細胞質のMAPキナーゼは不活性型、核のMAPキナーゼは活性型であることを明らかにした。また免疫組織化学により卵核胞崩壊の直前にMAPキナーゼが核に集中することを示した。このようなことからMAPキナーゼが細胞質においてMAPキナーゼキナーゼによって活性化し、核に移行し、卵核胞崩壊を誘起するとの仮説を提出した。2)膿腫卵胞から分離した卵胞液で卵母細胞を培養しても、卵母細胞はほぼ正常に減数分裂を再開始し、成熟し、受精した。3)生殖細胞分化に関わる2つの遺伝子、すなわちショウジョウバエovo遺伝子に高いホモロジーをもつ遺伝子を同定した。このうちの一つの遺伝子は274個のアミノ酸をコードする酸性アミノ酸でセリンリッチな構造をもつ。他の遺伝子は179個のアミノ酸をコードし、zinc finger domainをもつ。これらの遺伝子産物は核内に分布する。生殖細胞が急激な分化を示す時期に強く発現する。4)タンパク質合成阻害剤により減数分裂中期の微小管の構築が凝縮した。また、MAPキナーゼの活性も低下した。MAPキナーゼの活性の維持のためには特定の時期におけるタンパク質合成が必要であった。5)生殖細胞の減数分裂に関わる遺伝子、すなわちショウジョウバエovo遺伝子に高いホモロジーをもつ遺伝子を同定した。

1）我们发现MAP激酶在诱导猪卵母细胞成熟中发挥着核心作用。特别是，我们开发了一种分离卵核囊泡的方法，并使用蛋白质印迹法，我们发现细胞质 MAP 激酶不活跃，而核 MAP 激酶则活跃。免疫组织化学还表明，MAP 激酶在卵泡塌陷之前集中在细胞核中。基于这些发现，我们提出了这样的假设：MAP激酶被细胞质中的MAP激酶激活，转移到细胞核，并诱导卵泡塌陷。 2)即使当卵母细胞在从多肿卵泡分离的卵泡液中培养时，卵母细胞也几乎正常地重新开始减数分裂、成熟并受精。 3)鉴定出两个参与生殖细胞分化的基因，即与果蝇卵基因高度同源的基因。其中一个基因编码 274 个氨基酸，这些氨基酸是酸性氨基酸，具有富含丝氨酸的结构。另一个基因编码 179 个氨基酸并具有锌指结构域。这些基因产物分布在细胞核内。它在生殖细胞快速分化期间强烈表达。 4）蛋白质合成抑制剂在减数分裂中期浓缩了微管结构。 MAP 激酶活性也降低。需要在特定时间合成蛋白质以维持 MAP 激酶的活性。 5）我们鉴定了一个参与生殖细胞减数分裂的基因，即与果蝇卵基因高度同源的基因。